胶质母细胞瘤采用多模式强化治疗方案，但无法治愈

胶质母细胞瘤 (GBM) 是成人中最具侵袭性的脑肿瘤，尽管采用了强化的多模式治疗方案，但仍然无法治愈。大多数 GBM 肿瘤表现出突变或过表达的 EGFR，然而，用酪氨酸激酶抑制剂 (TKI) 治疗的肿瘤将不可避免地复发，这突出表明需要确定参与 GBM 对这些药物耐药的信号通路。必要性。为此，我们用增加浓度的吉非替尼 ( ) 和分离的抗性克隆处理过表达 EGFR 的 GBM 细胞。这些抗性克隆受到影响，并且发现几个基因的表达被上调。这些基因主要是酪氨酸激酶的受体，包括 ROS1、DDR1 和 ，并且已知控制 EGFR 的几个下游靶标。通过蛋白质印迹在蛋白质水平上证实了 ROS1 和 DDR1 的上调。用有效且高度特异性的吡唑 ROS1 抑制剂处理过表达 ROS1 的克隆导致这些细胞对低浓度的吉非替尼敏感。吉非替尼和 ROS1 抑制剂的联合治疗在延长 S 期细胞周期停滞后通过细胞凋亡诱导大量细胞死亡。我们目前的研究确定了 GBM 细胞在吉非替尼治疗后用来逃避细胞死亡的替代途径，并确定了新的治疗靶点，以防止 GBM 细胞对药物产生耐药性。吉非替尼和 ROS1 抑制剂的联合治疗在延长 S 期细胞周期停滞后通过细胞凋亡诱导大量细胞死亡。我们目前的研究确定了 GBM 细胞在吉非替尼治疗后用来逃避细胞死亡的替代途径，并确定了新的治疗靶点，以防止 GBM 细胞对药物产生耐药性。吉非替尼和 ROS1 抑制剂的联合治疗在延长 S 期细胞周期停滞后通过细胞凋亡诱导大量细胞死亡。我们目前的研究确定了 GBM 细胞在吉非替尼治疗后用来逃避细胞死亡的替代途径，并确定了新的治疗靶点，以防止 GBM 细胞对药物产生耐药性。

EGFR治疗耐药是诊所每天面临的一个地方性问题。虽然大多数脑肿瘤表现出过度表达或突变的 EGFR，但 TKI 仍然无效，甚至表现出一些反应的患者最终由于获得性耐药而复发。尽管与 TKI 易感性相关的突变在肺癌中是众所周知的，而导致获得性耐药的继发性突变也是众所周知的，但在脑肿瘤中尚未报道此类突变。为了确定与 EGFR 治疗耐药相关的遗传决定因素，特别是对 TKI 抑制剂吉非替尼 ()，我们对吉非替尼耐药和吉非替尼敏感的克隆进行了 RNA-seq，并确定了三种蛋白质，EGRF 受体，ROS1、DDR1 和ROS1、DDR1，由于抑制而高度表达。重要的，所有三种蛋白质本身都是酪氨酸激酶受体，并调节与 EGFR 激活相关的相同信号通路。尽管上调与 TKI 抗性有关，但据我们所知，没有关于 ROS1 和 DDR1 参与该过程的报道。因此，我们跟进了 DDR1 和 ROS1，并证实这些蛋白质也在蛋白质水平上调，而不仅仅是在 RNA 水平上。ROS1 蛋白的印迹也表明表达了几种涉及 ROS1 的融合蛋白。如前所述，ROS1 作为融合蛋白被激活，其中一些导致组成型活性嵌合蛋白。为了进一步研究 ROS1 过表达在吉非替尼耐药中的作用，我们使用了一种非常有效和特异性的吡唑 ROS1 抑制剂，并表明这种抑制剂使吉非替尼耐药细胞对低浓度药物敏感。ROS1与吉非替尼联合诱导耐药细胞和敏感细胞死亡的机制是通过S期细胞周期停滞和随后的细胞凋亡导致细胞死亡。

鉴于最近分子靶向疗法在治疗由致癌激酶驱动的癌症方面取得的成功，临床迫切需要确定选择性靶向 ROS1 融合的抑制剂。由于 ROS1 与间变性淋巴瘤激酶 (ALK) 结构域具有部分同源性，美国食品和药物管理局 (FDA) 批准的 ALK/MET 激酶抑制剂克唑替尼正在 I/II 期临床试验中研究其在 RO​​S1 驱动的疗效中的作用肺癌患者。与克唑替尼相比，本研究中描述的 ROS1 抑制剂在抑制 ROS1 重排方面更有效。最近，弗瑞替尼 () 和 Gö6976 也被证明是 ROS1 的有效抑制剂。福瑞替尼显示选择性抑制小鼠中 ROS1 融合驱动细胞系的生长以及FIG-ROS 驱动的肿瘤生长。

这些数据表明，吉非替尼耐药性肿瘤的基因筛查可以揭示导致药物耐药性的替代途径，并且这些途径可以被靶向以实现细胞死亡。针对本研究中确定的蛋白质的抑制剂的开发将为EGFR治疗难治的复发性脑肿瘤患者提供替代方案。微信扫描下方二维码了解更多：