奥希替尼泰瑞沙最新治疗进展 耐受药物性突变与突变的突变频率的突变

泰瑞沙()/奥希替尼()是突变特异性的第三代EGFR TKI，正在成为EGFR突变肺癌的一线治疗药物，但患者体内不可避免地会产生耐药性。我们在诱导肺腺癌的转基因小鼠模型中模拟了对奥希替尼的获得性耐药性，发现它主要通过 EGFR 或 /Q 的继发性突变介导。对受影响个体的循环游离 DNA 数据的分析表明，/V 突变几乎总是发生在驱动突变的背景下。小鼠治疗试验表明，厄洛替尼 ( ) 和阿法替尼 ( ) 均导致含有奥希替尼 ( ) 耐药药物的肿瘤消退，而只有阿法替尼 ( ) 对突变肿瘤有效。一线奥希替尼（）和厄洛替尼（）联合治疗可以防止继发性EGFR突变的出现。这些发现强调了了解耐药性突变的详细特征对于确定潜在的后续治疗方式和提出克服或预防体内奥希替尼耐药性的策略非常重要。

一线 ()/ () 的平均无进展生存期和总生存期为 39 个月，优于其他 TKI 观察到的结果。然而，患者并未治愈，需要更好地了解对奥希替尼的获得性耐药性。在这里，我们使用 EGFR 突变 LUAD 的 GEMM，表明对一线奥希替尼的耐药性可能是由于 EGFR 的获得性、、和突变。这是 EGFR 体内一线奥希替尼耐药药物模型中首次报道的突变。来自一线奥希替尼试验的数据显示，当获得对药物的耐受性时，分别在 7% 和 2% 的病例中检测到突变。在我们的小鼠模型中，在这些患者样本（具有多个驱动突变）中观察到的突变和突变频率高于等位基因特异性突变的更均匀分布。事实上，我们对 EGFR 突变肺癌患者的分析明确地表明，突变在肿瘤亚群中占主导地位，并且突变通常仅在 .为什么 /V 突变更有可能在受影响个体的突变背景中发现仍有待确定。这可能是由于不同突变组合的稳定性不同或其他生化特性（例如它们的激酶活性或二聚化特性）的差异。有趣的是，我们研究和其他研究的体外数据表明，携带 /V 突变的细胞可以存在并对奥希替尼产生耐药性，这表明体内自发产生的耐药机制可能与观察到的机制有关。机制有些不同。体外。

取代导致对 ()/() 药物耐药的机制很简单，因为它去除了与 () 共价反应的侧链硫醇。使用基于分子动力学的能量最小化获得的模型提供了一些关于 /Q 突变如何影响药物结合的见解。 L718 侧链与奥希替尼结合的野生型 EGFR TKD (PDB ID 4ZAU) 晶体结构中的药物苯环接触。因此，正如其他人所指出的，用 V 或 Q 替换 L718 可能会改变奥希替尼结合的模式或方向。我们通过对突变 EGFR TKD 与奥希替尼 ( )、厄洛替尼 ( ) 和阿法替尼 ( ) 的非共价复合物进行建模来证实了这一点。虽然奥希替尼在能量最小化的 TKD 复合物（718 位亮氨酸）中的位姿保持不变，但突变的范德华相互作用丢失并受到谷氨酰胺侧链冲突的空间阻碍。突变。这些效应在模型中通过将奥希替尼重新定位在药物结合位点得到补偿，这可能会将其与 C797 的共价反应定向在次优方向 - 正如之前关于 /EGFR 的辩论中一样。奥希替尼的结合能也降低了，这表明在共价反应之前“遭遇复合物”的亲和力可能会降低——这也会降低治疗效果。预计相同的突变对厄洛替尼结合能和方向具有相似的影响。在这种情况下，缺乏任何共价方面表明观察到的抗性一定是由于结合减弱所致。事实上，L718 在 EGFR/厄洛替尼 ( ) 晶体结构中直接接触厄洛替尼 ( )。最后，/Q 突变对阿法替尼 () 结合能的影响仅为奥希替尼 () 计算结果的 80% 左右，表明它们对阿法替尼 () 共价反应的停留时间影响较小。此外，() 的方向似乎受突变影响较小，虽然与 L718 的相互作用在变体中丢失，但 () 的结合方向与 Q718 侧链之间没有冲突。

通过在经过编辑的人类 EGFR 突变 LUAD 细胞系中进行的实验——模拟在存在低频亚克隆突变的情况下获得耐药性——我们表明亚克隆/Q 突变赋予了对 ( )/ ( ) 的耐药性药物耐受性。然而，该突变对较高剂量的奥希替尼保持了一定的敏感性，并且其在体内的频率随着奥希替尼的较高剂量而降低。在患者肿瘤活检报告中显示突变的仅有的三份报告也与 缺失同时发生，这在我们的一只小鼠和获得 /Q 突变的编辑 PC9-VanR 细胞中复制。 L718突变引起的EGFR不稳定可能会阻止它们在存在的情况下发生。

()/ () 现在是晚期 EGFR 突变肿瘤的首选一线治疗药物，制定克服耐药性的策略至关重要。正如几项体外研究和病例报告所暗示的，我们的研究结果证实了突变肿瘤对厄洛替尼的体内敏感性，但 /Q 突变肿瘤对厄洛替尼不敏感。正如之前的体外研究中所见，阿法替尼 ( ) 在所有携带或突变的肿瘤中引起肿瘤消退。这些数据与我们的报告一致，即患者通过肿瘤获得和突变对一线奥希替尼产生耐药性，并且他的疾病在阿法替尼治疗后稳定，类似于最近的两例二线奥希替尼（）+（1 5) 和 + 突变肿瘤。基于其临床治疗效果，阿法替尼 ( ) 目前已获得 FDA 批准用于治疗具有突变的肿瘤，这表明类似的机制可能是 L718 和 G719 突变体对阿法替尼敏感性的基础.

获得性 EGFR 和 Kras 突变解释了此处描述的几乎所有对 / 耐药的 GEMM 肿瘤病例。然而，已在患者中观察到其他耐药机制，总体而言，我们发现 EGFR 的继发突变在我们的小鼠模型中比在奥希替尼耐药的人类肿瘤中更常见。这可能反映了 GEMM 肿瘤的基因组复杂性降低以及突变 EGFR 转基因的表达由强力霉素持续驱动这一事实，这可能导致更大的靶向耐药倾向。因此，应使用其他模型来进一步发现不依赖 EGFR 的耐药机制并评估克服它们的治疗方式。尽管如此，我们的研究为奥希替尼的 EGFR 依赖性（和近端）耐药机制提供了重要的见解，并强调了奥希替尼耐药性的复杂性和异质性。我们的研究结果建议的临床研究的两个关键途径是：评估序贯 TKI 治疗，包括奥希替尼 ( )，其次是 2 个第二代 TKI，如阿法替尼 ( ) 或达克替尼，以及第一线

TKI 投资组合的评估。