抑制GPX4可促进吉非替尼易瑞沙耐药细胞铁死亡？

　　乳腺癌是最常见的女性肿瘤，也是女性死亡的主要原因。而三阴性乳腺癌(TNBC)有侵袭性表型、高复发率、高内脏转移率和更差的预后。尽管TNBC患者受益于标准化疗，但他们仍然面临高复发率和高耐药性的可能性。

　　铁死亡是一种由脂质过氧化物积累和活性氧(ROS)产生引发和发展的铁依赖性细胞死亡。铁死亡是由缺失的谷胱甘肽过氧化物酶4 (GPX4)活性特异性激活的。GPX4是一种抗氧化防御酶，具有修复脂质氧化损伤的功能，是铁死亡的主要抑制剂。值得注意的是，临床试验数据显示，吉非替尼在多种肿瘤类型的患者中耐受性良好。

　　然而，GPX4介导的铁死亡在TNBC细胞对吉非替尼敏感性中的作用在很大程度上是未知的，本研究通过监测铁调素的分泌来探讨GPX4在TNBC细胞对吉非替尼敏感性中的可能机制。

　　吉非替尼诱导的GPX4在Gef耐药的TNBC细胞TNBC细胞系MDA-MB-231和HS578T中表达构建Gef耐药菌株。用逆转录聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测GPX4的水平。结果：抗性品系中GPX4的表达高于敏感品系。结果表明：吉非替尼可以诱导TNBC细胞系MDA-MB-231和HS578T表达GPX4.

　　为了检测GPX4和吉非替尼敏感性之间的关系，在吉非替尼耐药细胞系MDA-MB-231和HS578T中沉默GPX4，发现RT-qPCR显示sh-GPX4组的GPX4表达低于sh-NC组。为了检测沉默GPX4后吉非替尼耐药细胞系的增殖，进行CCK-8和集落形成试验，发现随着吉非替尼浓度的增加，细胞活性抑制率显著增加，且与sh-NC组相比，sh-GPX4组显著提高了细胞活性抑制率，并降低了细胞集落形成。通过流式细胞术测量细胞凋亡率，并利用蛋白质印迹法测量增殖相关蛋白Ki-67和PCNA以及凋亡相关蛋白裂解半胱天冬酶-3和裂解半胱天冬酶-9.发现与sh-NC组相比，sh-GPX4组细胞凋亡率明显增加，Ki-67和PCNA水平明显降低，裂解caspase-3和裂解caspase-9水平升高。这些结果表明抑制GPX4可以增加TNBC细胞系对吉非替尼的敏感性

　　接着研究者用试剂盒检测MDA-MB-231和HS578T细胞中的MDA水平和谷胱甘肽水平。发现，与sh-NC组相比，GPX4沉默后丙二醛水平显著升高，谷胱甘肽水平降低，活性氧产生显著增加，基质金属蛋白酶减少。接着又检测了细胞内的铁浓度，发现与sh-NC组相比，GPX4沉默后细胞内铁浓度显著增加。又通过蛋白质印迹检测了铁死亡相关蛋白ACSL4、PTGS2、NOX1和FTH1的水平，发现与sh-NC组相比，ACSL4、PTGS2和Nox1水平显著上调，而FTH1水平在sh-GPX4组显著下调。上述结果表明：抑制GPX4可以促进吉非替尼耐药细胞的铁死亡。如有需要，请咨询海外医疗医学顾问：或扫码添加下方微信，我们将竭诚为您服务！

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