奥希尼耐药的一个新生突变含量及突变类型分析！

奥希替尼()是第三代EGFR-TKI药物，通过与C797氨基酸共价结合，选择性靶向EGFR敏感突变和耐药突变，用于患者治疗。在AURA和研究中，对于有突变的患者，用奥希替尼治疗取得了很好的效果。研究表明，奥希替尼组阳性患者的中位 PFS（10.1m VS 4.4 m）和客观缓解率（71% VS 31%）显着高于铂+培养美曲塞治疗组。

然而，耐药性是不可避免的。已发现奥希替尼的耐药机制如下：1、 EGFR本身位点突变，如突变[1-2]；2、 下游信号通路被激活，如BRAF和突变[3]；3、 旁路信号被激活，如 MET 放大 [4]。今年，上海肺科医院公布了国内首例奥希替尼耐药患者，并发现了新的EGFR耐药位点：[5]。

该患者是一名 56 岁的 IV 期女性肺腺癌患者，患有多个远处脑转移和骨转移。以下是患者的整个治疗史： 首先，患者接受了多线化疗和吉非替尼治疗后，疾病进展后进行基因检测，发现突变。然后接受了奥希替尼治疗，6.5个月后，病情进展，随后进行放疗。

为了找出患者对奥希替尼耐药的潜在原因，研究人员选择了三个时间点（pre-、PD、PD，如上图红字所示）采集血液并获取血浆样本，均被NGS发现测序：-4.28%的样本被检测到，有趣的是0.61%被检测到；1.在PD样品中检出85%，与组织结果一致；PD样本未检测到突变，但突变含量从0.61%增加到1.91%，如下图所示：

注意：作为对照，在全血样本中未检测到这三种类型的突变。

从以上数据可以看出，它是一种新的突变（de novo），对奥希替尼耐药。而且从三个时间点血浆的变化来看，是一个独立于和的突变位点。

为了证实该突变对奥希替尼的耐药性，研究人员进行了体外实验，探索了奥希替尼对携带不同类型突变的Ba/F3细胞系的GI50。的GI50为30-40nM，而突变体的GI50为1.5-2μm，增加了50倍，如下图：

另外，从上表可以看出，该突变对吉非替尼也有一定的耐受性。这是研究人员得出的结论，但为什么在PD的血浆样本中没有检测到呢？研究人员推断，可能是因为突变位点相对温和，所以当吉非替尼产生耐药性时，主要的突变是和突变。当/被奥希替尼抑制时，会大量出现，如下图所示的概念模型：

同时，该研究还揭示了该突变对奥希替尼的耐药机制：该突变导致奥希替尼与C797共价结合的位阻。突变的D796残基的亲水侧链插入奥希替尼的脂肪中心结构，或将奥希替尼挤出当前结合位置，或扭曲结合环影响铰链结合，从而影响奥希替尼与黑质的紧密结合。激酶区域产生耐药性。下图中黄色区域表示D796残基的侧链与奥希替尼的中心区域发生碰撞。

参考

[1] KS, CP, E, Cho BC, D, B, Lai Z, A, A, Y, D, SE, M, et al. EGFR 到细胞肺 EGFR。纳特医学。2015年；21:560– 562.

【2】。M、R、P、L、C、A、CA、L、G、E、Mor M、M. 作为新到 in. J. 2016；11:e121–123.

【3】。何 CC, 廖伟, 林 CA, Shih JY, Yu CJ, Yang JC. BRAF 一样。J. 2017;12:567–572.

[4] D、Y、F、A、N、L、JC。EGFR- 的 到 EGFR- 。安。2015年；26:2073–2078.

【5】Di, Min Hu, Yu Bai, Zhu, Lu, Wu, Wang, Li Liu, Wang, Jian Ni, Yang and Xu, EGFR to ., 2017, Vol. 8、（第3号0) , pp: -.