一聊贝伐单抗生物类似药肽图分析技术方法|肽图

它是一种重组人源化人血管内皮生长因子（VEGF）单克隆抗体。作为美国第一个获批的抑制肿瘤血管生成的药物，可用于治疗转移性结直肠癌和非鳞状非小细胞肺癌等。在中国，有10多种贝伐单抗生物类似药处于研发和营销过程中。生物仿制药的分析充满了技术挑战。贝伐单抗生物类似药的表征是质量控制的重点之一。，抗体肽图分析方法尤为关键。今天我们就来说说贝伐单抗生物类似物肽图分析技术方法。

肽图分析（ ）是研究抗体药物结构组成的重要技术之一。抗体经过酶切处理后，可以通过色谱结合岛津高分辨率Q-TOF质谱LCMS-9030进行分析，不仅可以分析蛋白质氨基酸序列，还可以分析翻译修饰（PTMs）可以进行相应肽的筛选。采用岛津反相高效液相色谱法分离不同性质的肽段，然后通过高分辨质谱对肽段进行一次和二次扫描，监测到的母离子和子离子与肽段对应的氨基酸序列和已有修饰相匹配。肽图分析是抗体蛋白药物质量控制的重要手段，

分析仪器和色谱柱解决方案

01分析仪器

LCMS-9030 四极杆飞行时间质谱仪将高速、高灵敏度的四极杆质谱与 TOF 技术相结合。融合岛津先进工程技术的DNA，打造兼具速度与卓越性能的新一代高分辨率质谱仪，以卓越的性能轻松应对定性和定量分析的挑战。

LCMS-9030

02 液相色谱柱

●反相肽分析柱

●长寿命、高耐压、峰值输出稳定

垫片组 GISS-HP，3um，150*3.0 mm

应用

以生物仿制药为例，对抗体蛋白进行胰蛋白酶消化，反相色谱质谱分离，然后进入高分辨率Q-TOF质谱进行一级全扫描和二级扫描，高分辨率数据提取、分析和匹配。对应的肽序列，完整的流程如下图所示。

数字。使用岛津 LCMS-9030 抗体进行测序的基本流程和示例

对于 的生物仿制药的序列分析，Shim-pack GISS-HP 色谱柱 (3um, 150*3.0 mm) 可以有效分离酶切后的轻链和重链肽，然后使用 LC-MS 9030进行了一次扫描和二次扫描，色谱质谱的参数如下表所示。

数字。使用岛津 LCMS-9030 抗体测序的详细参数

该软件分析高分辨率数据，然后匹配生物仿制药的重链和轻链序列，完成整个抗体的肽图分析。限于篇幅，展示重链肽序列部分数据，匹配覆盖率100%，可见岛津LCMS-9030 Q-TOF质谱仪在抗体肽分析方面的实力。部分序列分析结果如下图所示。

图 生物仿制药重链测序结果展示（部分展示）

结合前述案例，岛津建立了高分辨率质谱LCMS-9030完整的抗体药物肽图分析策略。此外，对于分子量分析、翻译修饰、二硫键分析、糖基化分析，LCMS-9030可以完成所有相关抗体。药品关键质量属性检测可以为用户节能增效，创造巨大价值。