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【摘要】目的:结直肠癌( ,CRC)是最常见的恶性肿瘤之一。近5-10年来,由于饮食结构变化、老龄化和环境污染等原因,我国结直肠癌的发病率和死亡率迅速上升。手术切除是早期结直肠癌患者的首选治疗方案。但在我国,约20-25%的大肠癌患者被诊断为IV期转移,约25%的患者在治疗过程中发生转移,失去根治性手术的机会。未经任何治疗,平均生存时间仅为6-9个月。除手术外,药物治疗在结直肠癌的生长和转移抑制中也发挥着重要作用。目前化疗联合西妥昔单抗或贝伐单抗可在一定程度上阻止结直肠癌的进展。术后复发率和死亡率仍然很高。因此,寻找一种新的、安全有效的药物显得尤为重要。百里酚 ( ) 是一种天然酚类化合物,在食品、医疗和化妆品领域被认为是安全无毒的。以往的研究表明,百里酚对肝癌、胃癌、乳腺癌、肺癌、卵巢癌等多种肿瘤具有显着的抑制作用,但其作用机制尚不清楚。此外,关于百里酚是否对结直肠癌有抑制作用及其潜在机制的研究较少。方法:首先用甲醇提取百里香全株,然后通过柱层析和半制备高效液相色谱法纯化,得到有效成分百里香酚。
CCK-8用于检测百里酚和Lovo细胞的增殖抑制作用及其对FHC的细胞毒作用;平板集落形成试验用于检测百里酚对Lovo和Lovo细胞集落形成能力的影响;流式细胞仪检测百里酚对He-Lovo细胞周期分布和凋亡的影响;迁移和侵袭试验用于检测百里酚对He-Lovo细胞迁移和侵袭的抑制作用。 Lovo细胞中β基因的过表达和β基因的过表达和β基因的过表达分别通过β-的过表达质粒和小干扰RNA(RNA、)进行,并进一步分析改变β-表达对增殖和增殖的影响。百里酚CRC细胞的迁移和侵袭抑制。此外,通过皮下注射和尾静脉注射细胞构建裸鼠皮下肿瘤模型和结直肠癌转移模型。此外,我们使用实时定量 PCR、蛋白质印迹和免疫组织化学从 mRNA 和蛋白质水平检测百里酚对 CRC 细胞、肿瘤组织和肺转移的增殖、凋亡和转移相关基因的影响。表达的影响。结果:百里香中的主要活性成分百里香酚对Lovo细胞的增殖有明显的抑制作用,且抑制作用呈现出一定的时间和浓度依赖性。
百里香酚(0-/ml)对正常大肠黏膜FHC细胞无明显细胞毒作用。与对照组相比,百里香酚各组细胞克隆数明显减少,差异有统计学意义(P0.001)。细胞周期实验结果表明,百里酚能有效地将细胞和Lovo细胞阻滞在G0/G1期,染色和流式细胞仪结果表明,百里香酚可以诱导结直肠癌细胞凋亡。 Lovo 细胞凋亡. 侵袭能力强, 并具有剂量依赖性抗性. 百里酚可通过激活 Bax/Bcl-2 信号通路诱导结直肠癌细胞凋亡. 此外, 百里酚可通过抑制 Wnt/ 的活化抑制结直肠癌上皮间质β-通路 β-过表达可部分抑制百里香酚对结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭和 EMT 抑制作用,而 β-沉默可增加百里酚对结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭和 EMT 抑制作用。结直肠癌细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT。直肠癌细胞的增殖,迁移,侵袭和EMT抑制。此外,百里酚可以剂量依赖性地抑制裸鼠移植瘤的生长,抑制体内大肠癌细胞的肺转移。该机制可能与百里酚有关。苯酚通过抑制Wnt/β通路的激活,从而抑制CRC细胞的增殖、迁移、侵袭和EMT。
结论:本研究以百里酚为研究对象,采用多种研究方法,在体外和体内证实了百里酚对结直肠癌细胞生长和转移的抑制作用及其机制。百里香酚能有效阻断Lovo细胞周期在G0/G1期,从而抑制增殖。 可通过下调 CRC 细胞中的 Bcl-2/Bax 比率诱导 Lovo 细胞凋亡。百里酚可以降低Lovo的迁移和侵袭能力,阻碍EMT过程。百里香酚可抑制裸鼠异种移植瘤的生长和体内结直肠癌的肺转移。百里酚抑制结直肠癌细胞的增殖、转移和EMT,其机制可能与百里酚抑制Wnt/β-信号通路活性,β-介导百里酚的抗结直肠癌作用有关。综上所述,百里酚可显着抑制结直肠癌的细胞增殖、侵袭、转移和EMT,其作用机制可能是通过抑制Wnt/β通路来实现的;百里酚有望用作单一药物或与其他药物一起使用。抗癌药物联合治疗CRC。
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