子宫内膜癌的靶向治疗方法及方法

【摘要】目的：子宫内膜癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率在我国呈上升趋势，且呈年轻化趋势，严重危害女性健康。目前，子宫内膜癌的主要治疗方法是手术、辅助放疗、化疗、激素等药物，但对晚期和复发性子宫内膜癌患者的治疗效果仍不理想。近年来，分子靶向药物在肿瘤治疗中不断得到研究，成为治疗子宫内膜癌的新方法。初步研究结果表明，它们具有一定的疗效。表皮生长因子受体 ( , EGFR）是一种酪氨酸激酶，参与信号通路中的信号转导，与各种肿瘤的发生发展密切相关。据报道，EGFR在许多实体瘤中表达或过表达，并且与疾病进展、放化疗耐药和预后不良有关。也有研究发现，EGFR过表达也存在于子宫内膜癌中，与子宫内膜癌的发生、发展和侵袭密切相关。应用高选择性、高效的EGFR抑制剂阻断EGFR信号转导系统已成为分子靶向治疗的主要方向。临床试验结果表明，EGFR抑制剂在治疗肺癌、乳腺癌、结直肠癌和其他肿瘤。其中，吉非替尼()是具有代表性的表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂，对多种肿瘤细胞系和动物肿瘤的生长有抑制作用。它可以通过抑制这种酶的活性来阻断信号。该通路的传递诱导细胞周期停滞和凋亡，从而抑制肿瘤细胞的增殖和生长。

吉非替尼还可以增强细胞毒性药物的生长抑制作用，具有抗血管生成活性和抗转移特性。然而，吉非替尼对子宫内膜癌的作用需要进一步研究。本研究以子宫内膜癌细胞为研究对象，在体外研究吉非替尼诱导细胞凋亡的作用及其下游可能的信号通路，并初步探讨其作用机制，是子宫内膜癌的靶向治疗。 . 提供新的想法。方法： 1、细胞培养：人子宫内膜癌细胞株在含10%胎牛血清的DMEM-F12培养基中培养，加入浓度为100 U/ml的青霉素和链霉素双抗体，37℃培养。 , 5%CO2、饱和湿度培养箱。路过< @0.25% 胰蛋白酶化。细胞单层贴壁生长，实验采用对数生长期。2、MTT比色法检测不同浓度吉非替尼对细胞生长的影响，倒置显微镜下观察细胞形态，绘制细胞生长抑制率曲线。3.流式细胞仪(,FCM)检测不同浓度吉非替尼对细胞周期变化和凋亡率的影响。4、采用-Blot法检测不同浓度吉非替尼对细胞内p-Akt及蛋白表达的影响。结果：1、吉非替尼对人子宫内膜癌细胞增殖的影响：不同浓度（5uM、10uM、20uM、40uM）的吉非替尼24小时后抑制率分别为5.11±<@0. 44%, 1<@0.58±<@0.07%，18.19±<@0.63%，33.03±<@0.46%；处理48小时后抑制率为7.52±<@0.71%, 16.52±<@0.25%, 30.@ >42±<@ 0.55%，45.09±<@0.47%；处理72小时后抑制率分别为15.38±<@0.59%、27.78±<@0.22%、4<

数据显示吉非替尼显着抑制细胞增殖。随着吉非替尼浓度的增加和作用时间的延长，抑制率逐渐升高，呈时间-剂量依赖性(P<@0.05）.2 吉非替尼对人子宫内膜形态的影响癌细胞：对照组细胞形态规则，呈长多边形，排列紧密，贴壁好，呈对数生长，不同浓度（5uM、10uM、20uM、40uM）吉非替尼处理细胞48小时，细胞萎缩变形，形态轮廓不清，细胞贴壁能力下降，细胞脱落悬浮，部分细胞解体坏死，部分细胞胞质内出现空泡。显示细胞凋亡特征，例如核浓缩和核碎裂。贴壁细胞密度明显低于对照组，凋亡细胞数多于对照组。3 吉非替尼对细胞凋亡和细胞周期的影响：不同浓度（5uM、10uM、20uM、40uM）的吉非替尼作用于细胞48小时，细胞凋亡情况如下：对照组<@0.45 ±<@0.18%，实验组分别为2.47±<@0.64%、7.42±1.38%、14.@ >05±3.00%，18.20±1.82%。随着吉非替尼浓度的增加，细胞凋亡率逐渐增加，

另一方面，S期和G_2//M期的细胞比例无显着影响。与对照组比较，不同浓度组间差异无显着性意义，无统计学意义（P<@0.05)。4 g非细胞周期阻滞引起细胞周期停滞的内部机制）替尼：采用印迹法检测不同浓度吉非替尼处理48小时后细胞中p-Akt和蛋白水平的变化，结果显示细胞中p-Akt和蛋白均表达。不同浓度（5uM、10uM、20uM、40uM）的吉非替尼，随着吉非替尼浓度的增加，细胞内p-Akt和蛋白浓度逐渐降低，并呈剂量依赖性，这与对照组相当。差异有统计学意义（P<<@0.05)。结论：1吉非替尼在体外对人子宫内膜癌细胞的生长有显着抑制作用，呈浓度和时间依赖性。 .2吉非替尼可在体外诱导人子宫内膜癌细胞凋亡，且随着吉非替尼浓度的增加，凋亡率增加，同时阻断G_0/G_1期细胞。3吉非替尼阻断细胞周期诱导细胞凋亡的分子机制可能与下调 p-Akt 蛋白和蛋白表达有关。以浓度和时间依赖的方式。.2吉非替尼可在体外诱导人子宫内膜癌细胞凋亡，且随着吉非替尼浓度的增加，凋亡率增加，同时阻断G_0/G_1期细胞。3吉非替尼阻断细胞周期诱导细胞凋亡的分子机制可能与下调 p-Akt 蛋白和蛋白表达有关。以浓度和时间依赖的方式。.2吉非替尼可在体外诱导人子宫内膜癌细胞凋亡，且随着吉非替尼浓度的增加，凋亡率增加，同时阻断G_0/G_1期细胞。3吉非替尼阻断细胞周期诱导细胞凋亡的分子机制可能与下调 p-Akt 蛋白和蛋白表达有关。