中国热带医学2014年第14卷第09期e：吉非替尼耐药

中国热带医学 2014 Vol.14 No.09e, Vol.14, No.09 吉非替尼耐药人肺腺癌细胞的建立及耐药机制研究 广东省广州市第一人民医院中心实验室 摘要：目的 建立吉非替尼耐药人肺腺癌细胞株A549/GR，并初步探讨其生物学特性和耐药机制。方法逐渐增加吉非替尼剂量，诱导人肺腺癌细胞A549形成吉非替尼耐药细胞株A549/GR；计算细胞生长曲线，计算耐药指数；显微镜下观察吉非替尼治疗前后A549、A549/GR细胞的形态变化；采用直接测序法检测EGFR基因酪氨酸激酶区基因突变；qRT-PCR检测mRNA水平EGFR基因表达的变化。结果CCK-8法测定A549/GR细胞的耐药指数为6.00，成功建立了吉非替尼耐药细胞模型。，其倍增时间比亲代细胞短；形态学观察显示A549/GR细胞极性消失，有长梭形趋势；A549/GR细胞系EGFR基因酪氨酸激酶区未发现基因突变；qRT-PCR 方法显示，与亲代细胞相比，A549/GR 细胞中的 EGFR 基因在 mRNA 水平上略有上调。qRT-PCR检测mRNA水平EGFR基因表达的变化。结果CCK-8法测定A549/GR细胞的耐药指数为6.00，成功建立了吉非替尼耐药细胞模型。，其倍增时间比亲代细胞短；形态学观察显示A549/GR细胞极性消失，有长梭形趋势；A549/GR细胞系EGFR基因酪氨酸激酶区未发现基因突变；qRT-PCR 方法显示，与亲代细胞相比，A549/GR 细胞中的 EGFR 基因在 mRNA 水平上略有上调。qRT-PCR检测mRNA水平EGFR基因表达的变化。结果CCK-8法测定A549/GR细胞的耐药指数为6.00，成功建立了吉非替尼耐药细胞模型。，其倍增时间比亲代细胞短；形态学观察显示A549/GR细胞极性消失，有长梭形趋势；A549/GR细胞系EGFR基因酪氨酸激酶区未发现基因突变；qRT-PCR 方法显示，与亲代细胞相比，A549/GR 细胞中的 EGFR 基因在 mRNA 水平上略有上调。表明成功建立了吉非替尼耐药细胞模型。，其倍增时间比亲代细胞短；形态学观察显示A549/GR细胞极性消失，有长梭形趋势；A549/GR细胞系EGFR基因酪氨酸激酶区未发现基因突变；qRT-PCR 方法显示，与亲代细胞相比，A549/GR 细胞中的 EGFR 基因在 mRNA 水平上略有上调。表明成功建立了吉非替尼耐药细胞模型。，其倍增时间比亲代细胞短；形态学观察显示A549/GR细胞极性消失，有长梭形趋势；A549/GR细胞系EGFR基因酪氨酸激酶区未发现基因突变；qRT-PCR 方法显示，与亲代细胞相比，A549/GR 细胞中的 EGFR 基因在 mRNA 水平上略有上调。

结论 成功建立了吉非替尼耐药人肺腺癌A549/GR细胞模型。A549/GR细胞产生耐药性与EGFR基因外显子18-21突变无关。关键词：吉非替尼；耐药性; 表皮生长因子受体；非小细胞肺癌@>9-1045-inib--,,-ping,LIYu-,´,,,thor:,E-mail::-/,.-/.CCK-0,dex.49/应付;应对;-RT -.-/.00,.-.;Q-RT-/up-ls(P