表皮生长因子受体的激活触发下游信号通路，调节参与肿瘤存活和生长的许多细胞过程

表皮生长因子受体 (EGFR) 的激活会触发下游信号通路，这些信号通路调节涉及肿瘤存活和生长的许多细胞过程。吉非替尼 () 是一种口服活性酪氨酸激酶抑制剂 (TKI)，靶向 EGFR (HER1;) 的 ATP 结合域。

方法

在这项研究中，我们使用标准化的基于 ATP 的肿瘤化学敏感性测定 (ATP-TCA) 来测量吉非替尼单独或与不同细胞毒性药物（顺铂、吉西他滨、奥沙利铂和硫丹）联合对各种固体的影响肿瘤（n = 86)，包括乳腺癌、结直肠癌）、食管癌和卵巢癌、原发部位不明的癌症、皮肤和葡萄膜黑色素瘤、非小细胞肺癌（ ）和肉瘤。计算每种单一药剂或组合的 IC50 和 IC90。索引以允许在样品之间进行比较 SUM 基于每种测试药物浓度 (TDC) 的肿瘤生长抑制百分比 (TGI) 计算。吉非替尼在 0.0625–2 (TDC = 0.446/ml) 的浓度范围内进行这项研究代表了 TKI 在测定中的首次使用。

结果

当针对单药吉非替尼（易瑞沙）测试肿瘤时，观察到的 TGI 程度存在异质性。 7%（6/86) 的肿瘤表现出相当大的抑制作用，但大多数表现出更温和的反应，导致 TGI 低。在所有测试的肿瘤中，单药吉非替尼的中位 IC50 值为 3.98 . 有趣的是，吉非替尼在与不同的细胞毒药物联合使用时具有阳性和消极作用。在测试的 59% (45/76）) 的肿瘤中，当与吉非替尼联合使用时，似乎增强了细胞毒药物或组合的效果（其中，11%（5/45） 的指数中有一个）>50% SUM 减少。在 38%（29/76) 的肿瘤）中，当与单独使用细胞毒药物相比，吉非替尼+细胞毒药物联合使用。在剩余的3%（2/76)）中，没有观察到变化。

结论

体外模型表明，吉非替尼（易瑞沙）可能对本研究期间测试的药物伴随的细胞毒性化疗产生不同的反应。所涉及的机制可能与 TKI 对生长速率的影响及其在化疗产生的凋亡刺激中存活的能力有关。影响。

这是第一项在 ATP-TCA 中成功测试 TKI 的研究。 ATP-TCA 具有协助 TKI 药物开发的潜力，并可能指导个体患者的治疗。它代表了对药物预测性肿瘤学测试需求的一个关键的可能答案，并且可以与临床试验一起进行，以获得与吉非替尼治疗患者的结果相关的数据。然而，很难确定这些是吉非替尼特异性还是非特异性作用，并且在临床环境中会看到类似的结果。这需要在使用该测试进行常规筛查之前确定。吉非替尼在测定中显示出活性，尽管预期不会产生细胞毒性作用，并且在某些情况下，ATP 水平的降低表明这些可能会发生。通常，观察到平坦的浓度-活性曲线，这与细胞抑制作用而非细胞毒性作用一致。吉非替尼单独在肺癌、卵巢癌和结肠癌中显示出活性。这些结果与之前在细胞系中的发现一致。

当吉非替尼（易瑞沙）与有限数量的细胞毒性药物联合进行测试时，观察到细胞毒性药物活性的增加和减少。例如，吉非替尼和顺铂的组合导致 67% 的样本的细胞毒活性降低。相比之下，当吉非替尼与第二种含铂药物奥沙利铂联合使用时，91% 的样本显示细胞毒活性增加。但需要注意的是，奥沙利铂实际上对受试细胞无效，因此这可能反映了单独使用吉非替尼的效果。当这些药物与吉非替尼联合使用时，在 4 个与顺铂、13 个与硫丹、1 个与奥沙利铂和 11 个与硫丹 + 吉西他滨一起使用的样品中观察到细胞毒剂的活性降低。这可能对患者有害。与他莫昔芬治疗对乳腺癌化疗成功率的影响相似。

尽管肿瘤对单药吉非替尼 () 的反应存在异质性，但 EGFR 免疫染色与吉非替尼活性之间没有关系，与其他已发表的研究一致。等人表明，吉非替尼在人类肿瘤异种移植物中引起生长抑制，与高水平的 EGFR 表达无关。然而，EGFR 激活导致至少三个独立的第二信使级联的激活。虽然 ras/raf 通路可能介导增殖作用，但生存信号被认为是由 PI3/Akt 通路介导的。由于细胞必须在 ATP-TCA 中死亡以记录增强的抑制作用，因此敏感性可能与其他机制对 Akt 途径的激活程度有关。因此，对吉非替尼和其他非 TKI EGFR 抑制剂的敏感性可能与通过检测 pAkt 评估的通路激活有关，而不是与 EGFR 表达水平有关。然而，这项研究没有发现任何这种关系，并且当将 EGFR 染色与 pAkt 染色进行比较时，EGFR 水平和 pAkt 活性之间没有相关性。等人 [27] 进行了类似的观察，其数据表明 MAPK 和 pAkt 都不是吉非替尼活性的可靠标志物。需要注意的是，许多受体导致Akt激活，PI3/Akt通路的组成型激活可能是PTEN失活的结果。

在 6 个样本（葡萄膜黑色素瘤和原发性未知）中，当使用单剂吉非替尼 () 进行测试时，具有指数 % 抑制率。 EGFR 和 pAkt 的组织化学染色材料。与未知原发性葡萄膜黑色素瘤相比，EGFR 和 pAkt 呈阴性（EGFR 和 pAkt 均呈阳性）。然而，具有相似 IHC 结果的样本并未显示出对吉非替尼的敏感性。由于 EGFR（HER1) 二聚体与其他 HER 分子并作为异二聚体介导更大的活性，这些分子的表达也可能对吉非替尼的活性很重要 [12] ]。因此，对吉非替尼的敏感性可能是最终结果细胞内一系列复杂的相互作用。

在这项研究中，我们发现吉非替尼（易瑞沙）与不同细胞毒药物（顺铂；吉西他滨；奥沙利铂；硫丹和硫丹+吉西他滨）的相互作用是一把双刃剑：它们对生长速度的影响可能使某些肿瘤易感伴随的细胞毒性化学疗法更具抗性，并且它们对细胞因子介导的细胞存活（抗凋亡）机制的影响可能会增强其他个体肿瘤对相同药物的敏感性。微信扫描下方二维码了解详情：