吉非替尼口服治疗,非小细胞肺癌患者的疗效

【摘要】目的：(1)评价吉非替尼治疗晚期非小细胞肺癌的疗效( ).(2)检测接受吉非替尼治疗的中晚期患者分析肿瘤组织标本中表皮生长因子受体（EGFR）酪氨酸激酶区、K-RAS基因突变及P16基因启动子区甲基化状态，分析EGFR、K-RAS基因突变与P16基因启动子之间的关系。区域甲基化和吉非替尼的疗效。(3)探索吉非替尼对博来霉素诱导的小鼠肺纤维化模型的影响及其作用机制。方法：(1)29例经病理证实的中晚期患者分期口服吉非替尼/天，按标准评价疗效。（2)回顾性采集29例患者石蜡肿瘤组织标本，提取组织标本DNA，PCR法扩增y EGFR基因外显子18-21，K-RAS基因外显子2，甲基化特异性PCR法扩增P16基因启动子区，扩增结果测序检测EGFR基因和K-RAS基因RAS基因突变和分析P16基因启动子甲基化水平，分析EGFR、K-RAS基因突变、P16基因启动子区域甲基化与吉非替尼疗效的关系。（3)将/6小鼠分为四组：生理盐水+生理盐水组、生理盐水+吉非替尼组、博来霉素+生理盐水组、博来霉素+吉非替尼组。经气管滴注博来霉素 激素法诱导小鼠肺纤维化模型的形成。

在第 14 天和第 21 天收集小鼠样本进行分析。采用HE染色、p-EGFR和p-EGFR染色及免疫组化染色对小鼠标本进行病理学评价。采用实时定量PCR分析小鼠标本中E-、Ⅰ、Ⅲ的含量，采用印迹法测定p-EGFR、β-蛋白的表达水平。结果：(1)本研究共29例经病理证实的中晚期患者接受吉非替尼口服治疗，患者客观肿瘤缓解率为37.9%，疾病控制率为 7%。2.4%，平均无进展生存期（PFS）为 10.0 个月，平均总生存期（OS）为 16.8 个月， 1年生存率为51.7%。吉非替尼的疗效与患者的性别、病理类型和吸烟状况显着相关（P<0.05)。总23例（79.3%）患者出现吉非替尼治疗副作用，主要表现为I/II级皮疹（65.5%）和腹泻（27. 6%).29例患者均未出现间质性肺炎等严重并发症。(2)患者肿瘤组织标本突变检测发现11例患者(37.9%)携带EGFR基因突变, 4 例患者 (13.8%) 有 K-RAS 基因突变n. EGFR基因突变与患者吉非替尼治疗疗效呈正相关（P<0.05)@ >，对延长吉非替尼治疗后患者的总生存期有显着影响。

K-RAS基因突变与患者吉非替尼疗效呈负相关（P<0.05)，无进展生存期与总体生存时间缩短有统计学意义，在P16基因甲基化检测中，15例（55.6%）患者检测到P16基因启动子区域高甲基化，但P16基因甲基化存在碱化水平与患者临床特征及吉非替尼疗效无相关性（3)HE染色及染色结果显示生理盐水+吉非替尼组病理表现与生理盐水+生理盐水相似组，吉非替尼未诱发明显肺纤维化表现；博来霉素+生理盐水组肺纤维化程度高于博来霉素+吉非替尼组。免疫组化染色显示：博来霉素+吉非替尼+吉非替尼组p-EGFR和吉非替尼的表达水平低于博来霉素+生理盐水组。实时定量PCR分析结果显示，生理盐水+吉非替尼组I型胶原和III型胶原含量明显高于生理盐水+生理盐水组。两组之间没有差异； 21 d时博来霉素+生理盐水组胶原蛋白I和胶原蛋白III的表达水平显着升高；与博来霉素+生理盐水组相比，博来霉素+吉非替尼组中Ⅰ型胶原、Ⅲ型和β-胶原的含量呈下降趋势，E-的表达各组间无显着差异。印迹分析结果显示，各组间β-表达无差异；博来霉素+吉非替尼组p-EGFR和p-EGFR表达水平无差异；博来霉素+生理盐水组用量无显着差异。结论：(1)吉非替尼对二线化疗失败的晚期疾病患者有效且耐受性良好。(2)EGFR基因突变与吉非替尼疗效呈正相关。K- RAS基因突变与吉非替尼疗效呈负相关，P16基因启动子区高甲基化与吉非替尼疗效及生存期相关，两者无相关性（3)未发现吉非替尼加重博莱霉素致小鼠肺纤维化的研究。