,单抗在抗血管生成治疗中的生存预后恶性脑肿瘤

逆转胶质瘤中贝伐单抗和替莫唑胺治疗耐药的方法和机制。第一部分：胶质瘤干细胞通过自噬诱导贝伐珠单抗耐药机制及逆转及其逆转（me，GBM）是人类生存预后最差的最常见的原发性恶性脑肿瘤。手术切除、术后替莫唑胺（TMZ）联合同步放疗和辅助化疗已成为新诊断GBM的标准治疗方法。然而，即使经过积极治疗，GBM患者的中位生存时间也仅为14.6个月，成人高级别胶质瘤的1年和5年生存率分别约为30%和13%，分别。贝伐珠单抗()是一种重组人源性单克隆中和抗体，2009年获批用于复发性胶质母细胞瘤。临床研究表明，虽然使用贝伐珠单抗可延长无进展生存期，但并未显着提高GBM患者的总生存期. 本课题组在早期研究了胶质瘤血管拟态()的特点及形成机制，发现胶质瘤干细胞具有形成血管拟态的能力，在胶质瘤干细胞形成血管拟态的过程中发挥着关键作用。目前，血管拟态对靶向 VEGF 的抗血管生成疗法（如贝伐单抗）缺乏反应。它不会显着提高 GBM 患者的总生存期。我组在早期研究了胶质瘤血管拟态()的特点和形成机制，发现胶质瘤干细胞具有形成血管拟态的能力，在胶质瘤干细胞形成血管拟态的过程中发挥着关键作用。目前，血管拟态对靶向 VEGF 的抗血管生成疗法（如贝伐单抗）缺乏反应。它不会显着改善 GBM 患者的总生存期。我组在早期研究了胶质瘤血管拟态()的特点和形成机制，发现胶质瘤干细胞具有形成血管拟态的能力，在胶质瘤干细胞形成血管拟态的过程中发挥着关键作用。目前，血管拟态对靶向 VEGF 的抗血管生成疗法（如贝伐单抗）缺乏反应。

早期的实验还表明，在没有VEGF的情况下，胶质瘤干细胞仍然可以形成血管拟态。自噬（）是细胞进化的、保守的生物过程。细胞可以通过自噬的过程将细胞质和细胞器包装成自噬体（），然后自噬体和溶酶体融合形成自噬作用。酶体 () 会降解其中所含的物质。研究表明，在抗血管生成治疗中，缺氧诱导的自噬促进肿瘤细胞的存活，而抗血管生成药物可以通过HIF1α促进肿瘤干细胞的富集。肿瘤抗血管生成治疗（如贝伐珠单抗）无效的因素很多，其中血管旁路的形成是一个重要原因。血管拟态的主要形成细胞是肿瘤细胞，它们的结构特征决定了它们对抗血管治疗不敏感。此外，应用抗血管生成药物后，肿瘤内血管数量减少，血供不足，导致缺氧、乳酸升高等应激状态，可触发肿瘤细胞的自噬活动。 . 现有关于自噬和血管拟态的研究表明，自噬和血管拟态在形成条件和机制上有很多相似之处。提示自噬可能参与了肿瘤血管拟态的形成，进而导致贝伐珠单抗抗血管生成治疗胶质瘤策略效果不佳。

越来越多的证据表明，ROS的作用是复杂而矛盾的，尤其是ROS参与了对维持细胞稳态非常重要的生物过程。相关研究表明ROS在VEGF-通路中起调节作用。自噬可以通过 PI3K/AKT 与 ROS 相关联。本节要讨论的主要内容和问题包括：（1)探索自噬在用贝伐珠单抗抗血管生成治疗胶质瘤中的作用；（2)探索胶质瘤干细胞通过自噬的机制）结果：1.联合使用氯喹可提高贝伐单抗对胶质瘤干细胞移植小鼠的治疗效果；2.通过ROS自噬-PI3K/AKT通路激活胶质瘤干细胞-2细胞。结论：本部分研究阐明了胶质瘤干细胞自噬、ROS、PI3K/AKT与-2磷酸化激活的关系，阐明了胶质瘤干细胞激活自噬2的分子机制。这证实了血管拟态的血管旁路是导致脑胶质瘤患者贝伐单抗抗血管治疗效果不佳的重要原因，为肿瘤患者开展个体化抗血管治疗提供理论依据和实验依据。第二部分炎症小体-IL-1β通路在胶质瘤替莫唑胺耐药中的作用和机制已成为肿瘤化疗药物疗效不佳或失败的主要原因，其产生机制复杂，涉及联合用药。多种因素的影响。这部分研究阐明了胶质瘤干细胞中自噬、ROS、PI3K/AKT和-2磷酸化激活之间的关系，阐明了胶质瘤干细胞激活-2的分子机制。这证实了血管拟态的血管旁路是导致脑胶质瘤患者贝伐单抗抗血管治疗效果不佳的重要原因，为肿瘤患者开展个体化抗血管治疗提供理论依据和实验依据。第二部分炎症小体-IL-1β通路在胶质瘤替莫唑胺耐药中的作用和机制已成为肿瘤化疗药物疗效不佳或失败的主要原因，其产生机制复杂，涉及联合用药。多种因素的影响。这部分研究阐明了胶质瘤干细胞中自噬、ROS、PI3K/AKT和-2磷酸化激活之间的关系，阐明了胶质瘤干细胞激活-2的分子机制。这证实了血管拟态的血管旁路是导致脑胶质瘤患者贝伐单抗抗血管治疗效果不佳的重要原因，为肿瘤患者开展个体化抗血管治疗提供理论依据和实验依据。第二部分炎症小体-IL-1β通路在胶质瘤替莫唑胺耐药中的作用和机制已成为肿瘤化疗药物疗效不佳或失败的主要原因，其产生机制复杂，涉及联合用药。多种因素的影响。

因此，对肿瘤耐药机制的研究应从多途径、多环节、多层次、多靶点考虑，以提高肿瘤化疗药物的治疗效率。替莫唑胺是一种咪唑类衍生物，1999 年被 FDA 批准为复发性 GBM 的第二代烷化剂，2005 年被推广为初诊 GBM 的一线化疗药物。同时放疗联合辅助化疗可使GBM患者的中位生存时间由12.1个月延长至14.6个月，两年生存率将从10.提高4% 到 26.5%。然而，由于 O6-甲基鸟嘌呤-DNA 甲基转移酶（06-DNA -，MGMT）的高表达，55% 的 GBM 患者没有从替莫唑胺化疗中获益。由于GBM本身分子特征的多样性、异质性和复杂性，替莫唑胺治疗耐药的机制和相应的治疗策略仍有待进一步探索。炎症小体是一种多蛋白复合物，可以激活-1。炎症小体的激活使这些细胞分泌成熟的IL-1β和IL-18并释放到细胞外，进而执行相应的生物学功能。炎症小体在肿瘤发生和发展中的作用已有报道。研究表明，IL-1β可以直接驱动胃癌和乳腺癌的发生或通过免疫监视机制促进肿瘤进展。替莫唑胺治疗耐药的机制及相应治疗策略的研究仍有待进一步探索。炎症小体是一种多蛋白复合物，可以激活-1。炎症小体的激活使这些细胞分泌成熟的IL-1β和IL-18并释放到细胞外，进而发挥相应的生物学功能。炎症小体在肿瘤发生和发展中的作用已有报道。研究表明，IL-1β可以直接驱动胃癌和乳腺癌的发生或通过免疫监视机制促进肿瘤进展。替莫唑胺治疗耐药的机制及相应治疗策略的研究仍有待进一步探索。炎症小体是一种多蛋白复合物，可以激活-1。炎症小体的激活使这些细胞分泌成熟的IL-1β和IL-18并释放到细胞外，进而执行相应的生物学功能。炎症小体在肿瘤发生和发展中的作用已有报道。研究表明，IL-1β可以直接驱动胃癌和乳腺癌的发生或通过免疫监视机制促进肿瘤进展。炎症小体的激活使这些细胞分泌成熟的IL-1β和IL-18并释放到细胞外，进而执行相应的生物学功能。炎症小体在肿瘤发生和发展中的作用已有报道。研究表明，IL-1β可以直接驱动胃癌和乳腺癌的发生或通过免疫监视机制促进肿瘤进展。炎症小体的激活使这些细胞分泌成熟的IL-1β和IL-18并释放到细胞外，进而执行相应的生物学功能。炎症小体在肿瘤发生和发展中的作用已有报道。研究表明，IL-1β可以直接驱动胃癌和乳腺癌的发生或通过免疫监视机制促进肿瘤进展。

炎症小体促进黑色素瘤和肺癌肿瘤的血管生成，其在乳腺癌、前列腺癌和非小细胞肺癌的侵袭和转移中的作用也有报道。就GBM而言，目前的一线化疗药物替莫唑胺，通过其烷基化作用，使肿瘤细胞的DNA发生错配修复反应，进而导致胶质瘤细胞凋亡。这种反应对胶质瘤细胞是很大的压力，所以很可能激活胶质瘤细胞内的炎性体通路分泌IL-1β，然后通过分泌的IL-1β激活下游信号通路，发挥一定的生物学功能。结合我们课题组此前的基因芯片结果，胶质瘤干细胞表达和分泌的IL-1β高于非干细胞。我们推测炎症小体-IL-1β通路可能是胶质瘤对替莫唑胺治疗产生耐药性的机制之一。本节要讨论的主要内容和问题包括：（1)探讨替莫唑胺治疗对胶质瘤细胞炎症小体-IL-1β通路的影响，以及该通路在胶质瘤替莫唑胺治疗耐药中的作用;（2)探究IL-1β发挥生物学功能的下游通路机制。结果：1.替莫唑胺可激活胶质瘤细胞炎症小体通路，胶质瘤细胞分泌IL-1β增加;2. IL-1β中和抗体阻断IL-1β通路，增加肿瘤细胞对替莫唑胺治疗的敏感性；3. 阻断 IL-1β 通路降低替莫唑胺治疗后胶质瘤细胞中 MGMT 的表达、干燥和 IL-6 的表达。结论：本节初步阐明了炎症小体-IL-1β通路在胶质瘤对替莫唑胺耐药中的作用及机制，认识了其在胶质瘤耐药中的作用。为针对该通路的胶质瘤治疗策略提供基础理论和实验依据具有重要意义。