拉菲尼对宿主免疫和ACT反应的影响及其潜在机制

肿瘤微环境需要大量的转移性T细胞和各种免疫抑制因子和细胞，限制了过继性T细胞疗法（ACT）的临床应用。越来越多的证据表明，适当剂量的化疗药物可以作为免疫支持剂而不是免疫抑制剂，并且与免疫治疗联合治疗往往比单药治疗有更好的治疗效果。据报道，索拉非尼/索拉非尼在高、低剂量下对多种癌症的免疫调节作用存在争议。然而，低剂量索拉非尼对宿主免疫和ACT反应的影响程度尚不清楚。在这里，我们使用了完整的 E。G7/OT-1 小鼠模型，以了解连续低剂量索拉非尼对肿瘤微环境和转移性 CD8+ T 细胞的影响及其潜在机制。索拉非尼通过抑制和其他免疫抑制因子来降低免疫抑制因子的表达，并增强转移的CD8+ T细胞的功能和迁移。CD8+ T 细胞用颗粒酶 B 启动子转导，以驱动成像报告器在过继转移之前可视化转移的 CD8+ T 细胞的活化和分布。与CD8+T细胞或索拉非尼单药组相比，联合治疗组发现CD8+T细胞活化和肿瘤抑制效果更好。索拉非尼治疗组不仅降低了免疫抑制因子，还降低了髓源性抑制细胞（）和调节性T细胞（），通过逆转免疫抑制微环境。这些结果表明，索拉非尼的抑癌作用不仅是通过消灭肿瘤细胞，而且是通过改变肿瘤微环境，这对ACT的结果有显着帮助。

临床前和临床研究都表明，肿瘤微环境在限制 ACT 的有效性方面起着不可或缺的作用。阻断肿瘤微环境中免疫抑制的关键调控通路，可以显着提高ACT的抗肿瘤作用。本研究利用成熟的 E.G7/OT-1 小鼠模型证明索拉非尼/索拉非尼是一种多激酶靶向药物，用于治疗 HCC 和 RCC，可以逆转不利的肿瘤微生物。环境和提高ACT的治疗效果。体外和体内。

由于大多数化疗药物的免疫抑制作用，ACT和化疗联合治疗癌症仍然具有挑战性。紫杉醇 (TAX)、顺铂 (CIS) 和阿霉素 (DOX) 等化疗药物已显示出一些积极的免疫学效果，可能有助于 ACT 的结果。这些药物通过多种机制改变免疫微环境，包括由肿瘤细胞凋亡诱导的更好的免疫原性、肿瘤相关抗原和 6-磷酸甘露糖 (M6P) 表达的上调以及 Fas/依赖性通路的调节。肿瘤细胞对细胞毒性T淋巴细胞敏感，Treg的消除和肿瘤基质破坏导致大量肿瘤浸润CTL。索拉非尼下调 TGF-β 和其他免疫抑制因子（如 IDO、VEGF、和 IL-10） 在 E.G7 细胞中。不仅TGF-β表达降低，而且在索拉非尼治疗后发现细胞表面的TGF-βI受体减少。结果表明，索拉非尼阻断了对肿瘤进展和免疫抑制至关重要的 TGF-β 信号通路。据报道，IDO、VEGF和IL-10可降低CD8+T细胞活性，增加CD4+T细胞中Treg转化，使巨噬细胞极化为免疫抑制性M2亚型。另一方面，肿瘤浸润淋巴细胞（TILs）的数量也会影响ACT的结果。血管。其产生与CD8+T细胞的浸润和其他免疫抑制细胞的调节高度相关，和索拉非尼已被证明可以靶向内皮细胞中的表达并降低癌细胞中 VEGF 的表达。此外，CCL2/MCP-1 作为单核细胞趋化因子和免疫抑制因子通过 TAM 和 Treg 的募集抑制 CD8+ T 细胞浸润。CCL2/MCP-1 在免疫抑制中起关键作用，因此抑制 CCL2/CCR2 通路可能成为癌症治疗的可能 已经证明延长 CD8+T 细胞的存活时间与 Bcl-2（一种抗-凋亡基因）转导ACT。FasL 使活化的 CD8+ T 细胞对 Fas 介导的细胞凋亡敏感。它在免疫抑制中起重要作用。瑞安等。证明通过使用 FasL-/low 细胞系，阻断 FasL 表达可以抑制体内免疫逃逸。索拉非尼治疗后，E. CCL2/MCP-1 作为单核细胞趋化因子和免疫抑制因子通过 TAM 和 Treg 的募集抑制 CD8+ T 细胞浸润。CCL2/MCP-1 在免疫抑制中起关键作用，因此抑制 CCL2/CCR2 通路可能成为癌症治疗的可能 已经证明延长 CD8+T 细胞的存活时间与 Bcl-2（一种抗-凋亡基因）转导ACT。FasL 使活化的 CD8+ T 细胞对 Fas 介导的细胞凋亡敏感。它在免疫抑制中起重要作用。瑞安等。证明通过使用 FasL-/low 细胞系，阻断 FasL 表达可以抑制体内免疫逃逸。索拉非尼治疗后，E. CCL2/MCP-1 作为单核细胞趋化因子和免疫抑制因子通过 TAM 和 Treg 的募集抑制 CD8+ T 细胞浸润。CCL2/MCP-1 在免疫抑制中起关键作用，因此抑制 CCL2/CCR2 通路可能成为癌症治疗的可能 已经证明延长 CD8+T 细胞的存活时间与 Bcl-2（一种抗-凋亡基因）转导ACT。FasL 使活化的 CD8+ T 细胞对 Fas 介导的细胞凋亡敏感。它在免疫抑制中起重要作用。瑞安等。证明通过使用 FasL-/low 细胞系，阻断 FasL 表达可以抑制体内免疫逃逸。索拉非尼治疗后，E. CCL2/MCP-1 在免疫抑制中起关键作用，因此抑制 CCL2/CCR2 通路可能成为癌症治疗的可能 已经证明延长 CD8+T 细胞的存活时间与 Bcl-2（一种抗-凋亡基因）转导ACT。FasL 使活化的 CD8+ T 细胞对 Fas 介导的细胞凋亡敏感。它在免疫抑制中起重要作用。瑞安等。证明通过使用 FasL-/low 细胞系，阻断 FasL 表达可以抑制体内免疫逃逸。索拉非尼治疗后，E. CCL2/MCP-1 在免疫抑制中起关键作用，因此抑制 CCL2/CCR2 通路可能成为癌症治疗的可能 已经证明延长 CD8+T 细胞的存活时间与 Bcl-2（一种抗-凋亡基因）转导ACT。FasL 使活化的 CD8+ T 细胞对 Fas 介导的细胞凋亡敏感。它在免疫抑制中起重要作用。瑞安等。证明通过使用 FasL-/low 细胞系，阻断 FasL 表达可以抑制体内免疫逃逸。索拉非尼治疗后，E. 它在免疫抑制中起重要作用。瑞安等。证明通过使用 FasL-/low 细胞系，阻断 FasL 表达可以抑制体内免疫逃逸。索拉非尼治疗后，E. 它在免疫抑制中起重要作用。瑞安等。证明通过使用 FasL-/low 细胞系，阻断 FasL 表达可以抑制体内免疫逃逸。索拉非尼治疗后，E.

为了研究索拉非尼/索拉非尼如何增强体内CD8+ T细胞的功能，我们连续应用五次低剂量索拉非尼（7.5 mg/kg/day）来完善E .G7/OT-1小鼠模型以了解免疫调节并阐明该方法是否可以应用于 ACT。根据我们的初步研究，确定了联合治疗中使用的 CD8+ T 细胞的数量。不同数量的 CD8+ T 细胞被转移到 E.G7 荷瘤小鼠中。从过继转移后的第9天开始，当转移了200万个或更少的CD8+ T细胞时，肿瘤再次生长。相比之下，在接受 5×106 或 10×+ T 细胞的小鼠中发现了完全的肿瘤抑制。因此，2×+ T 细胞 (2T) 与低剂量的索拉非尼联合使用。2T+sora组CD8+T细胞活化与5T组相似，并且明显优于单独的2T组。在ACT后第3天检测到这两组获得的峰值信号，但2T+sora组的信号长于5T组。值得注意的是，5T和2T+sora组的肿瘤从第3天开始缩小。两组之间没有显着差异，表明结合较少数量的 CD8+ T 细胞和连续低剂量索拉非尼治疗癌症的潜在治疗策略。此外，如蛋白质印迹所示，索拉非尼/索拉非尼在连续低剂量索拉非尼治疗后降低了相关的免疫抑制因子。这些蛋白质中的一些被认为与 和 的扩增有关，这两种蛋白质都可能导致 CD8+ T 细胞的抑制。在这里我们发现连续低剂量索拉非尼治疗后这两种类型的免疫抑制细胞减少。这些发现与曹等人报道的结果相似。在小鼠肝癌模型中，荷瘤小鼠接受30mg/kg/天的治疗两周，其百分比明显下降。尽管两种类型的细胞都减少了，但我们在研究中没有发现任何意义。这种差异的可能原因可能是由于本研究中使用的剂量较低，即7.5 mg/kg/天（曹等人使用的剂量的四分之一。一），更短的治疗时间（5天） 最近，Chen等人也表明索拉非尼降低了携带HCC的动物模型中CD8+T细胞的数量和PD-1的表达，这与我们的研究结果相似。

我们的发现可能为接受索拉非尼/索拉非尼作为标准治疗的转移性肾细胞癌或肝细胞癌患者的临床 ACT 研究铺平道路。一旦针对这一特定癌症实体的 I 期临床研究成功进行，人们甚至可以考虑使用低剂量索拉非尼作为不同癌症实体（包括黑色素瘤或多发性骨髓瘤）的免疫治疗增强剂，例如 ACT 或其他疗法。未来值得发现其他免疫调节剂如索拉非尼联合ACT或其他免疫疗法，以及低剂量索拉非尼对ACT中其他免疫细胞如DCs和TAMs的影响，以进一步阐明免疫ACT 微环境全景中的系统和肿瘤。总之，通过压制。抑制这些免疫抑制因子会降低Treg的转化和MDSC的诱导，否则会阻碍CD8+T细胞的功能。IDO负责肿瘤细胞中色氨酸的代谢，在索拉非尼/索拉非尼治疗后具有内源性和外源性。当这些免疫抑制因子和细胞下降时，转移的CD8+ T细胞可能表现出更好的功能和存活时间，提高ACT的治疗效果。此外，ACT前给予低剂量索拉非尼可降低转移风险，CD8+T细胞数量是阻碍ACT应用的障碍之一。采用这种组合策略将促进ACT的使用；另一方面，较低剂量的索拉非尼和 CD8+ T 细胞也可能提高患者的生活质量。