使用贝伐珠单抗副作用 生命科学学院课程论文（2015至2016学年度第2学期）

贝伐珠单抗在肿瘤治疗中的应用生命科学学院课程论文（作业）封面（2015-2016学年第2学期）（东北农业大学生命科学学院） 摘要：贝伐珠单抗是一种重组人源化免疫球蛋白G1单克隆抗体，可抑制肿瘤通过抑制血管内皮牛生长因子 (VEGF) 的活性和抗血管生长来促进生长。已广泛应用于结直肠癌、肺癌、卵巢癌等。在该类肿瘤的治疗中，优盈联合治疗可显着提高治疗有效率，延长肿瘤患者的无进展生存期和总生存期。与基础化疗。本文主要介绍贝伐单抗的制备过程，肿瘤治疗的机制，以及该类药物的未来发展。关键词：贝伐单抗；准备过程；血管内皮生长因子；抗肿瘤 癌症是威胁人类健康的主要疾病之一。癌症的防治也是抗体药物研发的主要靶点，ZO，此前在临床上使用的大部分肿瘤治疗药物都存在“我们不是敌人”的问题，即在杀死肿瘤的同时细胞，它们也会破坏正常的人体细胞。“生物导弹”为解决这一问题提供了理想的思路。该药物通过静脉注射到人体中，药效分子集中在肿瘤细胞上，不仅增强了疗效，而且减少了对机体的毒副作用。单克隆抗体因其良好的均一性和高特异性而被广泛应用于癌症治疗领域。结直肠癌是消化道常见的恶性肿瘤之一。

我国大肠癌在男性和女性常见恶性肿瘤中分别居第五位。结直肠癌导致的死亡占所有肿瘤的5. 6%。近年来，随着单克隆抗体的发展，抗血管内皮生长因子（VEGF）药物在抗肿瘤领域的有效应用，显着降低了结直肠癌患者的死亡率。贝伐单抗是罗氏治疗转移性结直肠癌的重磅药物。它是一种人源化抗 VEGF 单克隆抗体。贝伐单抗于2004年获得美国FDA批准，商品名为“阿瓦斯汀”。其治疗直肠癌的机制是与血管内皮生长因子（VEGF）特异性结合，阻止其与受体相互作用，对肿瘤血管产生多重作用，使已有的肿瘤血管退化，阻断肿瘤细胞的生长。它需要氧气和其他营养物质，可以提高化疗药物的效果。在2015年全球十大畅销药物排行榜中，贝伐珠单抗以72.79亿美元的销售额位列榜首。我国的抗体药物产业还处于起步阶段。虽然在近10个国家涌现出了许多专业从事单克隆抗体药物生产的公司，如中新国健、百泰生物等，许多传统药企也加入了抗体药物领域。但总体而言，我国抗体产业普遍面临细胞系表达水平低、培养规模小、

贝伐单抗的未来在市场上是非常有前景的。2.设计原理2.1 血管生成与贝伐单抗的抗肿瘤机制。肿瘤依靠周围组织中的血管获得血液供应以持续生长和扩散。研究发现，直径在100~以上的肿瘤在生长过程中，血管的形成起着至关重要的作用，异常的血管生成过程导致肿瘤组织的脉管系统出现结构紊乱、供血不足、和血管。通透性增加等特征，这些特征导致恶性肿瘤对于使用细胞毒性化疗药物的有效性降低，并增加转移的风险[2]。血管生成的复杂过程需要脉管系统的参与，循环内皮细胞和促血管生成介质，包括 VEGF。其中，VEGF/是重要的信号转导通路。VEGF通过与组织上皮细胞中表达的and-2结合激活细胞内信号转导通路，导致血管内皮细胞增殖和新血管的形成（另见：?m Res，1999）。VEGF的表达与恶性肿瘤的进展、分期、腹水形成、无瘤生存期的缩短、整体预后不良等密切相关。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。和促血管生成介质，包括 VEGF。其中，VEGF/是重要的信号转导通路。VEGF通过与组织上皮细胞中表达的and-2结合激活细胞内信号转导通路，导致血管内皮细胞增殖和新血管的形成（另见：?m Res，1999）。VEGF的表达与恶性肿瘤的进展、分期、腹水形成、无瘤生存期的缩短、整体预后不良等密切相关。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。和促血管生成介质，包括 VEGF。其中，VEGF/是重要的信号转导通路。VEGF通过与组织上皮细胞中表达的and-2结合激活细胞内信号转导通路，导致血管内皮细胞增殖和新血管的形成（另见：?m Res，1999）。VEGF的表达与恶性肿瘤的进展、分期、腹水形成、无瘤生存期的缩短、整体预后不良等密切相关。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。VEGF通过与组织上皮细胞中表达的and-2结合激活细胞内信号转导通路，导致血管内皮细胞增殖和新血管的形成（另见：?m Res，1999）。VEGF的表达与恶性肿瘤的进展、分期、腹水形成、无瘤生存期的缩短、整体预后不良等密切相关。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。VEGF通过与组织上皮细胞中表达的and-2结合激活细胞内信号转导通路，导致血管内皮细胞增殖和新血管的形成（另见：?m Res，1999）。VEGF的表达与恶性肿瘤的进展、分期、腹水形成、无瘤生存期的缩短、整体预后不良等密切相关。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。导致血管内皮细胞的增殖和新血管的形成（另见：?m Res, 1999）。VEGF的表达与恶性肿瘤的进展、分期、腹水形成、无瘤生存期的缩短、整体预后不良等密切相关。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。导致血管内皮细胞的增殖和新血管的形成（另见：?m Res, 1999）。VEGF的表达与恶性肿瘤的进展、分期、腹水形成、无瘤生存期的缩短、整体预后不良等密切相关。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。免疫组化检查显示VEGF在肿瘤和转移组织中均有表达，恶性腹水和血清中均可检测到。在肿瘤患者中检测到的 VEGF 和表达是独立的预后因素 (?m Res, 1996)。

更重要的是，VEGF的表达具有肿瘤特异性。它在恶性肿瘤中高表达，在交界性肿瘤中度表达，而在1E正常组织中几乎不表达。此外，VEGF介导的新生血管在基底膜上有间隙，这使得肿瘤细胞容易扩散。因此，VEGF被认为在肿瘤生长、腹水形成和肿瘤转移中起重要作用，靶向治疗血管生成在肿瘤治疗中的作用越来越受到重视。贝伐单抗作为重组人源单克隆抗体，是目前研究最多的抗血管生成药物。其作用机制是通过与VEGF结合，抑制血管内皮细胞增殖和活化，阻止VEGF与其天然受体结合，从而发挥抗血管生成和抗肿瘤作用。此外，根据Jain (Jain, Nat Med, 2001)提出的传统假设，抑制VEGF会重新启动促血管生成和抗血管生成之间的平衡，导致异常肿瘤组织结构、功能和微环境以及血管系统的扭曲趋于正常化，从而促进化疗药物的吸收并降低肿瘤转移的机会[3-8]（另见：?m et al., Res, 2012 2.2.1用In结直肠癌近年来，化疗联合抗血管生成治疗的应用导致转移性结直肠癌（mCRC）的III期临床研究表明，贝伐单抗联合化疗可显着提高治疗效果。

[10] 将813名晚期结直肠癌患者随机分为两组，分别给予5-氟尿嘧啶（5-FU）+亚叶酸+伊立替康联合或不联合贝伐单抗治疗。结果显示，化疗联合贝伐珠单抗组受试者的总生存期（OS）显着长于单独化疗组（20.3个月 vs 15.6个月， HR =0.66, P (SAFC) () 三种CHO无血清培养基，锥形瓶中细胞培养，确定细胞密度、细胞存活率和表达水平，合适的细胞基础培养基为成分的选择，鉴于我公司在使用本公司细胞系补料培养基方面的丰富经验，进料培养基为化学限制性培养基，成分明确，不含蛋白质水解物。培养的产品适合下游纯化，因此，我们研究并优化了Cell系列补料培养基中常用的Cell、Cell和Cell的添加工艺[15]。3.3.3 纯化过程3. 3.3. Sure亲和层析的层析介质是大规模单克隆抗体捕获技术的行业标准。深度过滤后，将培养上清液加载到亲和层析柱上，确定生产亲和层析的临床前中试方案。Cell和Cell常用的Cell系列补料培养基[15]。3.3.3 纯化过程3. 3.3. Sure亲和层析的层析介质是大规模单克隆抗体捕获技术的行业标准。深度过滤后，将培养上清液加载到亲和层析柱上，确定生产亲和层析的临床前中试方案。Cell和Cell常用的Cell系列补料培养基[15]。3.3.3 纯化过程3. 3.3. Sure亲和层析的层析介质是大规模单克隆抗体捕获技术的行业标准。深度过滤后，将培养上清液加载到亲和层析柱上，确定生产亲和层析的临床前中试方案。

33.3.2. Q-FF阴离子交换层析用于单克隆抗体及其片段的分离纯化。Q-FF阴离子交换色谱因其相对合理的价格和较长的使用寿命，分离条件温和，选择范围广，耐强酸强碱处理而被广泛使用。将样品进一步加载到阴离子交换层析柱上，通过流过法收集抗体，然后用盐和强碱去除介质上吸附的内毒素和核酸。3.33.3 在阳离子交换层析单克隆抗体纯化过程中，阳离子交换层析常与阴离子交换层析串联，因此我们采用阳离子交换层析的组合洗脱方式进行最后的精制。纯化，确定中试生产色谱方案。阳离子交换层析pH值的研究对于离子交换层析，抗体与层析填料的结合能力随pH而变化，因此pH值的选择非常重要。我们选择PH5.2、6.0、6.5、7.0 四种不同的pH条件。数量、纯度和产量决定了最佳 pH 值。色谱柱为预装柱（GE ），流速1ml/min，用0~100% B溶液线性洗脱25倍柱体积。3.< @3.4 制备工艺研究的原药选用同类市售对照品？2004年首次获美国FDA批准上市，2010年进入中国市场，已在全球上市83个。适用于转移性结直肠癌阿瓦斯汀联合5-氟脲密度为基础的化疗，适用于转移性结直肠癌患者的治疗。十年的临床应用历史证明了其良好的安全性。适用于转移性结直肠癌患者的治疗。十年的临床应用历史证明了其良好的安全性。适用于转移性结直肠癌患者的治疗。十年的临床应用历史证明了其良好的安全性。

以原药处方为基础，设计了6个处方，综合研究了不同辅料和辅料浓度下贝伐单抗注射液制剂的稳定性。预期目标 综上所述，贝伐珠单抗在治疗不同肿瘤和晚期肿瘤的多项临床试验中显示出非常好的疗效，可以显着提高患者的PFS或OS。然而，贝伐单抗的使用也已被证明对某些肿瘤在不同的治疗时期没有显着影响。因此，总的来说，贝伐珠单抗是对肿瘤治疗的良好补充，但在临床应用中，应充分考虑患者、病情、治疗三个方面，并整合患者的个体化信息。选择合适有效的贝伐珠单抗治疗人群，考虑用药过程中的不良反应，使患者在这种VEGF抑制剂的临床应用中获得最大的获益。参考文献：s [J].Curr Opin Dev, 2005,15(1):102: [J]. ,2013, 19(31): 5051-506 etal. Diag [J]. Chin Med (Engl),2015,128(3): 305-309,,, et al.-003,a huma onal [J].,2007,vol 7:6. O,,et I .-: [J].学报,2005,44(3):203-217. 176-178o [7] 董松, 朱建全, 吴一龙.

美国临床肿瘤学年报[J]. 薛迅, 2006, 67-73 ;,et al. 使用 [J].,2006,107(4):686-695., J,et al.Full-dose 90Y loa ap [J].CIin Res,2005,11(15.,9):7146-7150. [10], M,,etal.- ral -(RIT)in [J].J,2005,72 (2):125-131. [11] WOO JH 丄IU JS,KANG SH,et al.GMP char--tio anti-bis Fv() /ll [J]. ,2008, 58 (1):1-11. [12] B, CK, J, et al. CD+4CD+oryT pe FN18/- [J]. 2007,6&6):. [13] mana [J]., ,1604- 3745 2014,37(3):539- 544. [14] KC,WONG LG, YM.re [J].Leuk,2008,49:596 597.