奥昔替尼显著增强紫杉醇的抗肿瘤活性而不增加毒性

奥昔替尼在不增加毒性的情况下显著增强了紫杉醇的抗肿瘤活性。本研究试图通过使用奥昔替尼联合常规抗癌药物来逆转ABCB1或ABC CG2介导的MDR。ABC转运蛋白介导的多药耐药是化疗成功的主要障碍之一。研究最广泛的ABCB1和ABC CG2利用ATP水解产生的能量泵出底物化疗药物，导致MDR。幸运的是，一些tki，如拉帕替尼、厄洛替尼、阿帕替尼和阿法替尼，已被报道抑制ABC转运蛋白的功能，这些tki的发现代表了一种避免MDR的新策略。Ottinib (AZD9291)是第三代EGFRTKIs，对因EGFRT790M耐药突变而未能接受第一代和第二代EGFRTKI治疗的非小细胞肺癌患者有效。基于此，我们推测，奥昔替尼可能与ABC转运蛋白相互作用，以克服MDR和其他tki。

正如预期的那样，当奥昔替尼的细胞存活浓度超过90%时，已知的ABCB1和abcc 2底物化疗药物在ABCB1或abcc 2过表达细胞中的效率被奥昔替尼显著增强。同时，奥昔替尼不改变KB、MCF-7、S1、H460或HEK293/载体细胞对化疗药物的敏感性。此外，奥昔替尼并未增强顺铂(ABCB1和abcc 2的非底物)在ABCB1或abcc 2过表达细胞中的细胞毒性。以上结果证实了奥昔替尼对MDR细胞的体外致敏作用。为了进一步研究奥昔替尼是否能增强化疗药物在体内的疗效，我们采用KBv200细胞异种移植裸鼠模型评价其效果。与生理盐水对照组相比，单独使用奥昔替尼或紫杉醇均不能显著抑制KBv200细胞异种移植物的生长，但奥昔替尼在不增加毒性的情况下显著增强了紫杉醇的抗肿瘤活性。

通过拮抗ABCB1和abcg2的功能或下调其表达水平，可以逆转ABCB1和abcg2介导的耐药性。赫替尼可通过抑制ABCB1和ABCG2转运蛋白的外排功能，增加耐药细胞系DOX和Rho123的细胞内积累。此外，ABC转运蛋白利用ATPase水解释放的能量将底物泵出细胞。因此，ATP水解的速率与转运蛋白的转运活性成正比。奥昔替尼在低浓度下刺激ABCB1和ABC CG2的ATPase活性，这支持了奥昔替尼可能与底物相似，是这些转运蛋白的竞争性抑制剂。此外，通过与转运蛋白的-IAAP光亲和标记竞争，证实了奥昔替尼与ABCB1和ABCG2之间的相互作用。所有这些都与我们对其他全膝关节置换术的早期发现相一致。

由于奥昔替尼可以抑制ABCB1和ABCG2的转运功能，我们继续验证奥昔替尼是否会影响它们的表达水平。在细胞存活浓度超过90%时，奥昔替尼不改变ABCB1和ABCG2转运蛋白或mRNA的水平。此外，奥昔替尼不改变KBv200和S1-MI-80细胞中ABCB1和ABCG2的膜结合。这表明在设计浓度下，奥昔替尼不改变ABCB1和ABCG2的表达和膜位置。作为EGFR抑制剂，有报道称，奥昔替尼可以抑制EGFR、AKT和ERK的磷酸化，这些磷酸化细胞具有致敏性或T790M抗性突变。此外，PI3K/AKT激活和/或ERK通路与癌细胞对化疗的耐药性有关。在我们的研究中，在s1ERK-mi-80和KBv200细胞中，奥昔替尼不抑制表皮生长因子受体、AKT的磷酸化，或者奥昔替尼的存活浓度超过90%，这表明EGFR阻断、Akt AKT、ERK活性不太可能在编码为ABCB1的奥昔替尼-和ABCG2过度表达细胞的致敏作用中起重要作用。

西替尼在不增加毒性的情况下显著增强了紫杉醇的抗肿瘤活性。AML治疗的失败往往是由于ABC蛋白的药物外排，尤其是对化疗耐药的ABCB1。我们从11名被诊断为急性白血病的耐药患者中发现了4份高ABCB1表达的样本。4例患者骨髓标本中ABCB1的表达略有不同，因此对奥昔替尼的致敏反应也略有不同。我们发现，oxitinib可以显著增加Rho123在这四种高abcb1表达的原发性白血病母细胞中的积累，并增强DOX的细胞毒性。提示奥莫替尼可使abcb1高表达的白血病细胞对常规化疗药物敏感，可作为临床联合用药对抗abcb1介导的MDR。

总之，我们首次在体外、体内和体外提供了证据，证明奥昔替尼可以增强常规化疗药物对ABCB1-和ABC CG2过表达细胞的疗效。奥昔替尼通过抑制ABC B1/ABC CG2的转运功能而逆转MDR，从而导致细胞内积累的底物化疗药物增多，而不是通过下调其表达或改变膜位置。此外，奥昔替尼逆转MDR与阻断EGFR、AKT和ERK的磷酸化无关。我们的结果表明，临床应用奥昔替尼可以与常规ABCB1或abcc 2底物药物联合，以克服ABCB1或abcc 2介导的多药耐药。一盒奥替尼多少钱？哪里可以买到？