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总结:
目的探讨肿瘤相关巨噬细胞(TAM)和表皮生长因子受体/β-连环蛋白(EGFR/β-)信号通路在肝癌索拉非尼耐药中的作用机制。方法 采用密度梯度分离法培养外周血单个核细胞、M-CSF并诱导成TAM,对其表型进行鉴定,检测TAM分泌的表皮生长因子(EGF)水平,探讨EGF的作用。 CCK-8法检测对肝癌细胞增殖的影响。检测EGF对肝癌细胞侵袭和迁移的影响。将TAM与肝癌细胞共培养以探索下游信号通路,并通过药物敏感性测定、印迹和免疫组织化学染色培养R-和R-索拉非尼耐药细胞系。检测蛋白质水平和β-和EGFR的表达。结果 TAM 最初被分离和鉴定。与TAM细胞相比,培养获得的索拉非尼耐药R-和R-细胞的增殖、侵袭和迁移能力显着增强;非尼耐药细胞加入TAM后,生长速度明显高于对照组,索拉非尼耐药细胞和肝癌组织样本中β-和EGFR蛋白表达高于对照组团体。结论 β-信号通路促进索拉非尼耐药肝癌细胞的增殖、侵袭和迁移。
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