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【摘要】:目的:吉非替尼(,,商品名:,易瑞沙)是一种可逆的小分子酪氨酸激酶抑制剂,可与表皮生长因子受体酪氨酸激酶(EGFR-TK)催化区域上的Mg-ATP结合位点阻断EGFR信号。转导进入细胞,从而抑制异常细胞增殖、分化、抗凋亡、侵袭转移、血管生成等,起到抗肿瘤作用。临床前和临床试验表明,它对多种实体瘤有效,如非小细胞肺癌()、结肠癌和乳腺癌。临床上用于化疗失败或不适合化疗的局部晚期或远处转移。但临床数据显示,只有部分患者对吉非替尼有反应:东方人有效率25-35%,而西方人的有效率只有8-15%;并且即使最初有效的患者经过一段缓解期,部分患者也会出现疾病进展,即获得性耐药。本研究建立了吉非替尼耐药人结肠癌耐药细胞株HT-29/模型,并对其耐药机制进行了初步研究。材料与方法:本实验以人结肠癌细胞株HT-29为基础,逐渐增加培养基中吉非替尼的浓度,建立吉非替尼耐药细胞株HT-29/。采用MTT法计算HT-29和HT-29/的中位抑菌浓度(IC50)和耐药指数(RI);细胞计数法描述药物的生长曲线和群体倍增时间-抗性细胞和亲代细胞;流式细胞仪分析细胞周期分布的变化;MTT法检测HT-29/对5-Fu、DDP、L-OHP、CPT-11抗肿瘤药物的交叉耐药谱。采用免疫细胞化学方法检测比较两者在生殖细胞系中IGF-1Ra、P-IGF-1R和P-gp糖蛋白的分布和表达情况,进一步研究获得性耐药机制。结果:吉非替尼耐药人结肠癌细胞株HT-29/、HT-29/和HT-29 IC50分别为0./ml和0./ml,耐药
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