原发性能否逆转人肝癌/GEM对吉西多靶点药物,

【摘要】原发性肝细胞癌（HCC，以下简称肝癌）是临床上最常见的恶性肿瘤之一，其发病率和死亡率逐年上升。化疗在肝癌的治疗中发挥着重要作用，但肿瘤细胞的多药耐药性往往导致化疗失败。耐药性逆转剂的应用是克服肿瘤多药耐药性的重要手段，但大多数已证实的耐多药药物由于毒副作用大，限制了其广泛的临床应用。目前有研究报道细胞信号通路抑制剂可以逆转肿瘤多药耐药。索拉非尼是一种多靶点抗肿瘤药物，可通过抑制ERK1/2信号通路发挥抗肿瘤作用。目的：探讨索拉非尼能否逆转人肝癌细胞株/GEM对吉西他滨（GEM）的耐药性，进一步探讨其逆转作用的可能机制。方法：MTT法检测人肝癌细胞株对吉西他滨(GEM)、伊立替康(CPT-11)、紫杉醇(TAX)、表柔比星(EPI-ADM)、奥沙利铂(OXA)的耐药性。 5种化疗药物；选择敏感性较高的GEM，采用药物大剂量脉冲法诱导耐药人肝癌细胞株/GEM的建立；经索拉非尼/GEM治疗后抑制率为10 %,MTT RT-PCR和blot检测两种肿瘤细胞对GEM的敏感性，RT-PCR和blot检测/GEM中MDR-1/P-gp、ERK和-2的表达。

结果：1.药物筛选GEM、CPT-11、TAX、EPI-ADM和OXA对肝癌细胞株72小时的1次血浆峰浓度（PPC）分别为：6 3.98%、58.02%、55.82%、64.42%、48.53%。 2.采用大剂量间歇脉冲法建立人肝细胞癌/GEM耐药细胞模型。 GEM对/GEM细胞株72小时IC50为12.10ug/ml，MTT法对亲代细胞IC50为1.04，耐药率为11.@ >63 次。 3.索拉非尼对/GEM细胞抑制率检测1μg/ml的索拉非尼对/GEM细胞无明显抑制作用，高于此浓度呈剂量反应关系，索拉非尼对/GEM的IC50均< @4.38μg/ml，4.84μg/ml，分别。 4.1 μg/ml的索拉非尼可显着降低GEM vs/GEM的IC50，逆转倍数为3.08倍。 GEM显示索拉非尼治疗前后细胞系IC50无显着变化。 5.RT-PCR/GEM用1 μg/ml索拉非尼处理72小时，MDR-1、ERK,-表达强度明显降低，但仍高于细胞表达；目的细胞基因表达明显弱于/GEM细胞，索拉非尼治疗后无明显变化。

1.9@>印迹/GEM 1μg/ml索拉非尼处理72h，P-gp和-2表达明显降低，但仍高于细胞；在/GEM细胞中P-gp和-2的表达明显减弱，索拉非尼治疗后无明显变化。结论：1.人肝癌细胞系对GEM、CPT-11、TAX、EPI-ADM中度敏感，对OXA低敏感。 2.人肝癌细胞株在GEM大剂量间歇脉冲后对GEM产生获得性耐药，为肿瘤耐药性研究提供了理想的耐药细胞模型。 3.索拉非尼和吉西他滨之间没有交叉耐药性。 4.索拉非尼在体外具有逆转/GEM细胞株耐药性的作用。可能与抑制-2和ERK1/2信号通路，从而下调MDR-1的表达有关。