第一：突变所致吉非替尼耐药肺腺癌细胞放射敏感性变化的研究

【摘要】第1部分：突变引起的耐吉非替尼肺腺癌细胞放射敏感性变化的研究 目的：观察突变诱导的耐吉非替尼肺腺癌细胞PC-9/GR细胞放射敏感性的变化及检测放射敏感性相关分子标志物表达水平的变化。方法：采用液相芯片法检测PTEN mRNA的表达水平；采用印迹法检测PTEN、p-mTOR和p-AKT蛋白表达水平；通过集落形成试验观察辐照细胞的存活情况。结果：1、液相芯片法检测PC-9细胞中PTEN mRNA的相对含量为0.±0.，PC-9/GR细胞中PTEN mRNA的相对含量是 0.±0.。经统计学分析，两者有显着差异（p0.05).2、PTEN、p-mTOR和p-AKT蛋白在PC-9细胞中的相对表达量用2、印迹法检测，内容为：0.12±0.03、0.49±0.05、0.76±0.14，PC-9/GR细胞中PTEN、p-mTOR和p-AKT的相对蛋白含量为：0.65±0.@ >20.3@>0.15 ±0.04、0.34±0.07.经统计分析，这三个分子标记的表达在两个细胞中有显着差异（p0.05).

3、菌落形成实验表明：在不同剂量（0Gy、1Gy、2Gy、4Gy、6Gy）的6MV X射线作用下，PC-9和PC-9/GR的存活率单元格改变了 (10 0.00±0.00)% 减少到 (6.41±0.37)%, 由(100.00±0.00)%下降到(1.20±0.23)%。经统计分析，存活实验组各细胞存活分数与实验组有显着差异，与对照组（0Gy）相比有显着性差异；1Gy剂量下实验组细胞存活分数与对照组比较无显着性差异。两组及其余实验组在相同剂量下的存活率，PC-9/GR细胞均低于9个细胞，存在统计学差异。结论：在体外试验条件下，PC-9的放射敏感性/GR细胞高于其亲本PC-9细胞。第二部分：吉非替尼耐药ce因突变引起肺腺癌细胞放疗后耐药性逆转的研究目的：观察放疗后PC-9/GR细胞对吉非替尼耐药性的逆转。方法：MTT比色法检测细胞生长抑制情况。结果：1、MTT法显示吉非替尼在不同浓度（0.1μmo1/1、0.5μmo1/1、1μmo1/1、 5μmo1/1、10μmo1/1、20μmo1/1、30μmo1/1)，PC-9/GR细胞无辐射生长抑制率由(0.@ >51±0.08)% 增加到(22.23±2.63)%, 辐照后PC-9/GR细胞生长抑制率从 (28.12±3.12)% 增加到 (68.20±3.55)%.

统计分析显示，相同吉非替尼浓度下两组细胞生长抑制率存在显着差异（p0.05)。2、经计算，吉非替尼的替尼对辐射照射的PC-9/GR细胞的IC50值为（11.09±1.92)μnmo1/1，对于PC-9没有辐射照射的IC50值/GR 细胞为（31.78±2.11)μmo1/1，两者有统计学差异（p0.05)@ >.结论：在体外试验条件下，辐照后的PC-9/GR细胞对吉非替尼的敏感性高于未辐照的PC-9/GR细胞。