EGFR突变丰度的靶向治疗效果越好吗？（上）

奥希替尼()是第三代EGFR-TKI，已被指南推荐用于EGFR-TKI()进展后耐药突变的晚期非小细胞肺癌或晚期EGFR-TKI的一线治疗。敏感突变。

以往的研究证明，EGFR突变的丰度可以预测患者使用靶向药物的获益，即丰度越高，靶向治疗的效果越好。其他研究表明，单纯EGFR敏感突变患者的PFS明显长于其他突变如TP53的EGFR，提示EGFR是否为单纯突变可以决定疾病的预后。然而，这类研究只是定性研究，不能定量研究其与药物反应的关系。同时，仍有少数继发耐药患者在接受奥希替尼治疗后反应不理想。因此，迫切需要探索能够准确预测奥希替尼对治疗反应的生物标志物。

今天小编就为大家介绍一项中国学者对奥希替尼治疗反应的生物标志物研究。结果表明，来源的相对突变纯度（RMP）比相对突变丰度（RMA）更能预测奥希替尼。疗效和相对突变纯度是患者无进展生存期 (PFS) 的独立预测因子。

先介绍一下相关的定义：

循环肿瘤DNA是来自肿瘤基因的DNA片段，在人体血液循环系统中不断流动，并带有一定的特征（包括突变、拷贝数异常、甲基化等）。液体活检是提取血液中游离的肿瘤DNA片段并进行测序，以反映肿瘤变化的趋势。

相对突变纯度（RMP）定义为AF（等位基因频率）与MSAF（最大体细胞等位基因频率）的比值；相对突变丰度 (RMA) 定义为 AF（等位基因频率）与 EGFR AF 的比率。

通过量化突变的丰度（RMA）和纯度（RMP），检测更准确，能更好地反映肿瘤异质性

在这项回顾性研究中，54名接受奥希替尼治疗的晚期突变患者在接受奥希替尼治疗前进行二代测序，获得患者的RMP和RMA值，以评估他们对奥希替尼治疗的反应。以及对患者预后的预测价值。主要评价指标为客观缓解率（ORR）和无进展生存期（PFS）。

我们先来看看RMP。

RMP之一：RMP与奥希替尼的ORR和PFS呈正相关

Q1~Q4分别代表不同的RMP等级，依次增加。我们可以看到RMP水平与ORR呈正相关，Q1~Q4组的ORR分别为21%、33%、67%、77%（图1a）。同样，RMP和PFS的水平也呈正相关。Q1~Q4组的PFS为7.0个月、7.3个月、15.4个月、18.0个月（图1b）。Q4 组的疾病进展或死亡风险比 Q1 组低 71%。仅从这些数据，我们就可以明显感觉到RMP与奥希替尼的疗效有很好的相关性。RMP水平越高，奥希替尼的抗肿瘤作用越明显，PFS越长。

图1 RMP与奥希替尼治疗的ORR(a)和PFS(b)呈正相关

RMP 2：RMP可独立预测奥希替尼的治疗效果

当生物标志物进入临床应用时，为了保证令人满意的灵敏度和特异性，一般需要设置一个分界值（cut-off）来划分水平。根据ROC曲线，平衡最佳时RMP边界值为0.24（图2a）。使用这个cut-off将RMP分为低电平（RMP-low）和高电平（RMP-high），我们看到RMP-high组的ORR为65.6%（图2b），且PFS为1。7.6月（图2c），明显高于RMP-low组。

图2 RMP对奥希替尼疗效的预测（a）ROC曲线分析；(b) RMP对ORR的预测；(c) RMP对PFS的预测

那么RMP对奥希替尼疗效的预测效果是否受到其他因素的影响呢？由于单变量分析中只有 TP53 突变状态、RMA 和 RMP 可能影响 PFS，因此将这些因素包括在多变量模型中。我们可以看到，当 RMP 作为连续变量使用时，它是 PFS 的独立预测因子；当用作分类变量时，P虽然没有达到统计显着性，但已经很接近了。未检测到的差异可能与样本量等因素有关（表1）。这说明RMP可以很好地区分ORR和PFS的差异，是奥希替尼疗效的潜在预测标志物。

表1 无进展生存期患者的多因素分析

RMP 3：RMP 对奥希替尼的 PFS 预测与 TP53 的突变状态无关

TP53是肺癌常见的突变，TP53作为抑癌基因，可以影响多种通路的活性。因此，作者分析了 RMP 对 对 TP53 突变和 TP53 野生型患者 PFS 的预测作用。结果显示，无论TP53是否存在突变，高RMP水平的患者，奥希替尼治疗的PFS显着长于低RMP水平的患者（图3）。这进一步扩大了RMP-in的适用性进展 当奥希替尼预测 PFS 时，可以忽略 TP53 的突变状态。

图3 奥希替尼在TP53野生型（a）和TP53突变型（b）患者中PFS的RMP预测

使用相同的分析方法，让我们看看 RMA 的性能。

RMA之一：RMA与奥希替尼的ORR和PFS无明显相关性

Q1~Q4代表不同的RMA等级，依次递增。我们可以看到，RMA 水平和 ORR 之间没有明显的相关性。除了 Q1 组的 ORR 较低外，Q2、Q3、Q4 的 ORR 非常接近。对于 PFS，虽然总体趋势具有统计学意义，但 PFS 最长且风险最低的组是 Q3。这些结果表明 RMA 与奥希替尼的 ORR 和 PFS 没有显着相关性。

图4. RMA与接受奥希替尼的ORR（a）和PFS（b）无显着相关性

RMA 2：RMA可预测奥希替尼的治疗效果

那么由某个临界值设置的高低 RMA 水平对 ORR 和 PFS 有预测作用吗？

当 RMA 边界值为 0.3 时，敏感性和特异性的平衡最好（图 5a）。使用这个cut-off将RMA分为低级（RMA-low）和高级（RMA-high），我们看到RMA-high组的ORR为63.6%（图5b） )，中位 PFS 为 17.6 月（图 5c），明显高于 RMA-low 组。然而，在多因素分析中，RMA的独立预测效果并没有体现出来（表1）.

图5. RMA对奥希替尼疗效的预测（a）ROC曲线分析；(b) RMA 对 ORR 的预测；(c) RMA 对 PFS 的预测

RMP 可作为奥希替尼疗效的更好预测指标

是液体活检研究领域的一个重要方向。采集血液进行检测，并根据血样探索生物标志物来预测靶向治疗的疗效是肺癌领域的一个热点。这些相对无创、可动态监测的潜在标志物，也将成为肿瘤精准医疗和个体化治疗时代的新星。本研究表明，相对突变纯度可作为奥希替尼对患者疗效的独立预测指标，具有重要的临床应用价值。