劳拉替尼对ROS1WT表达细胞的优势

为了研究ROS1突变对ROS1对TKIs敏感性的影响，我们产生了表达EZR-ROS1WT和F3的细胞。细胞用浓度不断增加的克唑替尼、塞来替尼和劳拉替尼处理。生存力分析结果证实，与克唑替尼和塞来替尼相比。后者在抑制ROS1WT方面显示出相似的IC50值，而在天然ALK形式中，塞来替尼比克唑替尼具有明显的生物学优势。正如与ALK的结构相似性所暗示的，ROS1激酶结构域中的S1986FY取代导致克唑替尼和塞来替尼抗性。然而，劳拉替尼对S1986F和S1986Y突变仍保持较强的抑制活性。

第一个也是报道最多的ROS1G2032R突变对这三种化合物具有抗性。ROS1的蛋白质印迹分析和下游途径的激活证实了细胞存活率的测量。与克唑替尼和塞来替尼相比，需要较低剂量的劳拉替尼来降低ROS1的磷酸化，而只有高浓度的劳拉替尼似乎对ROS1G2032R的磷酸化有轻微影响。在S1986F/Y突变的细胞中，佐替尼和塞来替尼对ROS1磷酸化只有轻微的影响，导致持续的S6磷酸化和细胞存活。只有劳拉替尼可以完全关闭ROS1、AKT和ERK信号转导，从而在S1986Y或S1986F突变存在的情况下抑制S6磷酸化。总的来说，这些体外结果表明，ROS1赋予了克唑替尼和5-羟色胺b耐药的S1986F/Y突变，而洛替尼保持了其抑制能力。

我们还研究了蛋白抑制剂复合物的构象。由于突变位点复杂性的内在限制，正如相应的ALK C1156Y取代所报道的，S1986Y突变阻止了克唑替尼进入激酶结构域，而劳拉替尼可以固定并维持其诱导构象转变的能力。ROS1既有野生型也有突变型。在克唑替尼结合的情况下，alphaC螺旋富含甘氨酸的环末端的位置是由内而外的，而在劳拉替尼相互作用的情况下，情况正好相反，这可能解释了抑制ROS1突变体的差异能力。同样，1981Tins、L1982F、S1986Y/F、F2004C/V和D2033N ROS1突变将对塞来替尼产生耐药性，并对舍替尼产生耐药性。

由于2021年M2001T，冠寿L2026M和G2101A ROS1的突变仍易被塞来替尼抑制。较小的尺寸允许使用三磷酸腺苷结合袋。值得注意的是，最近的证据证实了我们的预测，即塞来替尼缺乏对抗D2033N和L1982F突变的活性，因为我们在这里验证了S1986Y/F突变和塞来替尼对抗L2026M保护突变的功能。ALK二级突变可以在ROS1激酶结构域中获得。正如ALK L1152R突变所观察到的，由于单核苷酸碱基突变，精氨酸残基不能取代L1982ROS1密码子的亮氨酸。然而，据报道，在突变筛查中，L1982F突变赋予了对克唑替尼和塞来替尼的抗性。

由于单核苷酸修饰，ROS1不能获得L1198F(对5-羟色胺和罗拉替尼耐药，克唑替尼再致敏；和S1206Y ALK突变。同样，M2001ROS1密码子可以产生M2001T，但不能产生M2001S或M2001N(据ALK报道为I1171密码子)。目前，人们越来越重视识别靶向治疗的耐药机制，更好地指导治疗策略，对患者预后产生有利影响。我们报道ROS1激酶结构域的两个新突变可以赋予克唑替尼耐药性，但允许洛替尼有效。利用表达天然或突变的EZR-ROS1的Ba/F3细胞，我们从功能上证明了S1986F/Y取代的克唑替尼和侧基给了你耐药性。与克唑替尼和塞来替尼相比，劳拉替尼对WT ROS1的作用更强，能对ROS1S1986F/Y细胞保持较强的生长抑制作用。Western blot分析证实，劳拉替尼是TKI测试的唯一一种完全关闭工程Ba/F3细胞中ROS1和下游信号磷酸化的ALK/ROS1。劳拉蒂尼一个月多少钱？哪里可以买到？详情请咨询下方微信。