西妥昔单抗联合化疗可延长晚期患者的OS和无进展

摘要： 背景与目的：肺癌是全球癌症死亡的主要原因，其发病率和死亡率均呈显着上升趋势。肺癌一般分为两类：非小细胞肺癌（non-cell lung，SCLC）和小细胞肺癌（SCLC），占所有肺癌病例的80%。%~85%。大多数患者在治疗时有局部进展或远处转移。对于此类患者，化疗常用于治疗。然而，研究表明，化疗不能改变大多数肺癌患者的长期治疗结果。受益程度已经最大化，即化疗的疗效达到了一个平台期。近年来，随着人们对肿瘤分子生物学和基因水平认识的不断深入，分子靶向治疗的研究和临床应用已成为人们关注的热点之一。最近的研究表明，酪氨酸激酶抑制剂（TKI）和细胞毒药物的不同给药顺序对抗肿瘤作用有明显影响，从而引起人们对细胞毒药物和分子靶向药物的最佳应用顺序的关注。西妥昔单抗联合化疗一线治疗晚期患者的临床试验（FLEX）表明，与单纯化疗相比，在化疗的基础上联合西妥昔单抗可延长患者的总生存期（，OS）。最近的研究表明，酪氨酸激酶抑制剂（TKI）和细胞毒药物的不同给药顺序对抗肿瘤作用有明显影响，从而引起人们对细胞毒药物和分子靶向药物的最佳应用顺序的关注。西妥昔单抗联合化疗一线治疗晚期患者的临床试验（FLEX）表明，与单纯化疗相比，在化疗的基础上联合西妥昔单抗可延长患者的总生存期（，OS）。最近的研究表明，酪氨酸激酶抑制剂（TKI）和细胞毒药物的不同给药顺序对抗肿瘤作用有明显影响，从而引起人们对细胞毒药物和分子靶向药物的最佳应用顺序的关注。西妥昔单抗联合化疗一线治疗晚期患者的临床试验（FLEX）表明，与单纯化疗相比，在化疗的基础上联合西妥昔单抗可延长患者的总生存期（，OS）。

在晚期治疗领域，多项临床研究（、、SAIL等）证实贝伐单抗联合化疗可延长晚期患者的OS和无进展生存期（-free，PFS）。然而，关于西妥昔单抗、贝伐单抗和细胞毒药物给药顺序的研究较少。目前国内外尚无类似研究的报道。本课题是观察多西他赛、西妥昔单抗和贝伐单抗给药顺序的基础研究。通过选择KRAS突变A549和KRAS野生型肺癌细胞系作为研究对象，分别给予不同序列的多剂量给药。给予西妥昔单抗、西妥昔单抗和贝伐单抗，给药后检测细胞凋亡相关蛋白、细胞周期阻滞和凋亡，观察到多西他赛联合西妥昔单抗，然后是贝伐单抗。单克隆抗体和多西他赛联合贝伐单抗继以西妥昔单抗对不同kras类型肺癌细胞系的抗肿瘤作用，确定西妥昔单抗和贝伐单抗的最佳应用顺序，为临床合理用药提供理论依据。方法：选取kras突变肺癌细胞系a549和野生型细胞进行培养传代，按照实验设计将细胞分为4组，即对照组、单药孵育组（txt、c22< @5、bev)，双药共孵育组（txt+bev,txt+c225)和双药共孵育单药序贯组（txt+c225→bev,txt） +bev→c225)，应用了mtt方法），

结果：1.多西他赛、西妥昔单抗和贝伐单抗的不同给药顺序对a549和肺腺癌细胞生长有一定的抑制作用。其中，两药联合培养和单药序贯组（txt+c225→bev，txt+bev→c225)对a549和细胞生长的抑制作用比单药组和单药组更显着。两药同时孵育组，但对a549和细胞生长有明显抑制作用，对a549和细胞生长的影响无明显差异。2.多西他赛单药对肺产生明显的G2/m阻滞作用腺癌a549和细胞；西妥昔单抗和贝伐单抗抗生素可阻断g0/g1期细胞；双药联合孵育组g2/m期细胞(txt+bev,txt+c225), g2/m期较对照组增加；而二药联合培养组、单药序贯组(txt+c225→bev, txt+bev→c225)与二药联合培养组相比细胞周期停滞无明显变化,对2个细胞系的细胞周期无显着影响，效果无显着差异。3.两种药物同时孵育和单药序贯组（txt+c225→bev,txt+ bev→c225)对a549和细胞凋亡的作用优于单药组和双药联合孵育组，但两者无差异。4.多西他赛、西妥昔单抗和贝伐单抗作用对不同时间序列的肺腺癌细胞系a549治疗后，bcl-2蛋白表达升高，bax蛋白表达降低，bcl-2/bax比值降低，说明多西他赛、西妥昔单抗和贝伐单抗可应用于不同的时间序列。其通过调节细胞中bcl-2和bax的表达来诱导细胞凋亡。结论：多西他赛联合西妥昔单抗后贝伐单抗和多西他赛联合贝伐单抗后西妥昔单抗单克隆抗体（TXT+C225→Bev，TXT+Bev→C225)对KRAS突变肺癌细胞系A549和野生型的生长、凋亡及凋亡相关蛋白含量有明显影响，但两种细胞系的抗肿瘤作用无显着差异。西妥昔单抗和贝伐单抗可以应用于不同的时间序列。其通过调节细胞中bcl-2和bax的表达来诱导细胞凋亡。结论：多西他赛联合西妥昔单抗后贝伐单抗和多西他赛联合贝伐单抗后西妥昔单抗单克隆抗体（TXT+C225→Bev，TXT+Bev→C225)对KRAS突变肺癌细胞系A549和野生型的生长、凋亡及凋亡相关蛋白含量有明显影响，但两种细胞系的抗肿瘤作用无显着差异。西妥昔单抗和贝伐单抗可以应用于不同的时间序列。通过调节细胞中bcl-2和bax的表达来诱导细胞凋亡。结论：多西他赛联合西妥昔单抗后贝伐单抗和多西他赛联合贝伐单抗后西妥昔单抗单克隆抗体（TXT+C225→Bev，TXT+Bev→C225)对KRAS突变肺癌细胞系A549和野生型的生长、凋亡及凋亡相关蛋白含量有明显影响，但两种细胞系的抗肿瘤作用无显着差异。